抑制eCIRP通过调控PANoptosis减轻肾纤维化的机制研究

【编辑推荐】本研究首次揭示细胞外冷诱导RNA结合蛋白（eCIRP）通过激活肾小管上皮细胞（RTECs）的PANoptosis（同步性细胞死亡）加剧肾纤维化，而小分子肽抑制剂C23可阻断eCIRP-TLR4/MD2通路，显著降低炎症因子（TNF-α/IL-6/IL-1β）和纤维化标志物（TGF-β/α-SMA/MMP2），为慢性肾病（CKD）治疗提供新靶点。

　　

引言

肾纤维化是慢性肾病（CKD）的终末病理表现，全球约10%-14%人口受累。肾小管上皮细胞（RTECs）因其高耗氧特性和抗氧化能力缺陷，成为损伤相关分子模式（DAMPs）的主要靶点。细胞外冷诱导RNA结合蛋白（eCIRP）作为一种强效DAMP，此前已被证实与急性炎症和多种程序性细胞死亡相关，但其在慢性炎症和肾纤维化中的作用尚未明确。本研究聚焦eCIRP通过PANoptosis（同步触发凋亡、焦亡和坏死性凋亡）促进RTECs损伤的机制，并探索肽类抑制剂C23的干预效果。

材料与方法

实验采用9周龄C57BL/6雄性小鼠，通过单侧输尿管结扎（UUO）构建肾纤维化模型。原代RTECs分离后，分别用eCIRP（1 μg/mL）和C23（5 μg/mL）处理48小时。通过qPCR、Western blot、免疫组化等技术分析炎症因子、PANoptosome组分（ZBP1/p-RIPK1/cleaved caspase-8）及细胞死亡标志物（NT-GSDMD/cleaved caspase-3/p-MLKL）。体内实验评估C23（8 mg/kg）对UUO小鼠肾损伤评分、胶原沉积（Masson染色）和纤维化蛋白（TGF-β/MMP2/α-SMA）的影响。

结果

1. 1.

   C23抑制eCIRP诱导的炎症反应：eCIRP刺激使RTECs中TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA分别升高6倍、14倍和100倍，而C23处理使三者降低64%-82%。ELISA显示细胞因子蛋白水平同步下降28%-67%。

2. 2.

   PANoptosis调控机制：eCIRP上调ZBP1表达3倍，并激活PANoptosome关键蛋白（p-RIPK1↑2倍，cleaved caspase-8↑1.5倍）。C23干预使三者降低35%-66%，同时显著抑制焦亡（NT-GSDMD↓35%）、凋亡（cleaved caspase-3↓41%）和坏死性凋亡（p-MLKL↓38%）。

3. 3.

   体内抗纤维化效应：UUO小鼠肾脏中，C23使ZBP1阳性区域减少76%，胶原沉积降低95%，并显著下调TGF-β（54%）和α-SMA（55%）。TUNEL染色显示凋亡细胞减少63%，损伤评分改善50%。

讨论

本研究首次阐明eCIRP通过TLR4/MD2-ZBP1轴触发RTECs的PANoptosis，驱动肾纤维化进程。C23通过竞争性结合eCIRP靶点，阻断下游炎症级联和细胞死亡交叉对话，其双重作用机制为：

• •

  抗炎：抑制TNF-α/IL-6释放，减少炎性微环境；

• •

  抗纤维化：阻断TGF-β信号持续激活，抑制RTECs向肌成纤维细胞转化（α-SMA↓）。

局限性包括单次给药、仅用雄性小鼠及短期观察，但结果为CKD治疗提供了新策略——靶向eCIRP-PANoptosis通路可能打破“炎症-纤维化”恶性循环。未来需探索C23在性别差异和长期疗效中的表现。

数据可用性

数据可根据合理要求提供。

（注：全文严格基于原文实验数据，未添加非文献支持结论；专业术语如PANoptosis、DAMPs等均保留英文缩写及原文大小写格式；上标/下标如IL-1β、p-RIPK1等均按规范标注。）