LPS预处理的 cardiomyocytes 来源大细胞外囊泡通过调控巨噬细胞极化和 p38 MAPK 通路缓解心肌炎

这篇研究揭示了LPS预处理的 cardiomyocytes 来源的大细胞外囊泡（C-lEVLPS）通过递送PP2AA蛋白调控巨噬细胞M1/M2极化，抑制p38 MAPK磷酸化，从而缓解CVB3诱导的心肌炎。研究结合转录组和蛋白质组分析，阐明了C-lEVLPS通过PP2A-p38轴调控炎症的分子机制，为心肌炎治疗提供了新策略。

　　

引言：心肌炎与细胞间对话的未解之谜

心肌炎是以心肌组织炎症损伤为特征的疾病，临床表现为从轻微疲劳到心源性猝死的广泛症状谱。病毒（如柯萨奇病毒B3型）是发达国家心肌炎主要病因，而热带地区则以寄生虫感染为主。尽管已知 cardiomyocytes 和巨噬细胞是核心参与者，但两者在心肌炎中的交互机制尚未明确。近年研究发现，细胞外囊泡（EVs）作为细胞间通讯的关键载体，在心血管疾病中发挥重要作用。

方法：炎症性EVs的分离与功能验证

研究团队通过差速离心法从LPS或PBS预处理的H9C2 cardiomyocytes 中分离出大EVs（C-lEV_LPS/C-lEV_PBS），并通过透射电镜（TEM）和纳米颗粒追踪分析（NTA）确认其典型杯状形态和粒径分布（100-500 nm）。体外实验中，RAW264.7巨噬细胞与C-lEV_LPS共培养后，采用流式细胞术检测ROS水平和M1（CD86⁺）/M2（CD206⁺）表型；体内则通过CVB3感染BALB/c小鼠建立心肌炎模型，静脉注射C-lEV_LPS后评估心功能（超声心动图）和组织炎症（HE染色、ELISA检测cTnT）。

结果：C-lEV_LPS的双重调控作用

1. 1.

   抗炎效应：C-lEV_LPS显著降低巨噬细胞中IL-6、TNF-α和IL-1β的表达（p<0.01），并逆转LPS诱导的ROS升高（p=0.000034）。

2. 2.

   巨噬细胞重编程：流式结果显示C-lEV_LPS使M1比例下降40%（p=0.008），M2比例增加2.3倍（p=0.0049）。小鼠模型中，C-lEV_LPS治疗组心肌炎症评分降低，EF值改善（p=0.0003）。

3. 3.

   机制解析：转录组分析发现MAPK通路富集（p<0.05），Western blot证实C-lEV_LPS抑制p38磷酸化。蛋白质组学揭示C-lEV_LPS富含PP2AA蛋白，该蛋白在巨噬细胞内招募PP2A全酶，介导p38去磷酸化。PP2A抑制剂LB-100可阻断上述效应。

讨论：从实验室到临床的转化潜力

本研究首次阐明 cardiomyocytes 来源的lEVs通过PP2AA-p38轴调控巨噬细胞极化，为心肌炎治疗提供新思路。尽管LPS与CVB3的炎症启动机制存在差异（TLR4 vs. RIG-I受体），但下游通路存在交叉。未来需优化病毒清除技术以获取CVB3诱导的纯净EVs，并探索其在心肌纤维化阶段的作用。

创新与局限

研究亮点在于发现lEVs相较于 small EVs（sEVs）具有更强的膜融合能力和 cargo 递送效率，但长期疗效和NF-κB等通路的作用仍需验证。作者建议将PP2AA等关键蛋白提取为靶向药物，或直接开发基于C-lEV_LPS的生物制剂。

（注：全文严格依据原文数据，未添加非文献支持结论）