组蛋白甲基转移酶抑制剂逆转病毒抑制期HIV感染者DNA损伤反应异常及病毒潜伏状态的研究

这篇研究揭示了长期抗逆转录病毒治疗(ART)的HIV感染者(PLHIV)存在DNA损伤标志物异常：全基因组低甲基化、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)升高和prelamin A积累。通过组蛋白甲基转移酶抑制剂(chaetocin)干预，不仅能提升全球DNA甲基化水平、减少prelamin A积累，还可逆转HIV潜伏状态（通过P24+CD4+T细胞和gag拷贝数增加证实），为抗衰老和"激活-清除"（shock-and-kill）治疗策略提供新思路。

　　

背景：

HIV感染者(PLHIV)即使接受长期抗逆转录病毒治疗(ART)仍面临早衰风险，其生物学年龄比HIV阴性者平均高5岁。慢性炎症导致的氧化应激会引发DNA损伤，表现为表观遗传层面的全基因组低甲基化、遗传层面的8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)升高，以及结构层面的prelamin A积累。本研究通过检测这些标志物，系统评估了PLHIV的DNA损伤状态，并探索甲基化调节剂RG108（DNA甲基转移酶抑制剂）和chaetocin（组蛋白甲基转移酶抑制剂）对逆转损伤和HIV潜伏的作用。

方法学创新：

研究纳入40-55岁病毒抑制的PLHIV和年龄匹配的HIV阴性对照，采用多维度检测技术：

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  流式细胞术检测T细胞活性氧(ROS)和prelamin A表达

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  比色法测定全血细胞5-甲基胞嘧啶(5mC)水平

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  ELISA检测血浆8-OHdG和血管紧张素-II

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  多重荧光检测促炎细胞因子谱

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  甲基化调节剂处理后，通过流式P24⁺CD4⁺T细胞比例和实时PCR检测gag拷贝数评估HIV再激活

关键发现：

1. 1.

   DNA损伤标志物异常：

   PLHIV表现出显著的全基因组低甲基化(p<0.0001)、8-OHdG升高(p=0.0017)及CD4⁺/CD8⁺T细胞prelamin A积累(p<0.0001)，但ROS水平无显著差异。

2. 2.

   免疫衰老关联性：

   低甲基化水平与CD28^-CCR7^-效应记忆T细胞呈负相关，与CD57⁺衰老T细胞正相关。prelamin A积累与CD25⁺活化T细胞显著相关(r=0.24)。

3. 3.

   8-OHdG的双重作用：

   与血管紧张素-II强正相关(r=0.609)，但意外与TNF-α(r=-0.384)和MCP-1(r=-0.424)呈负相关，提示其可能通过Rac-NADPH氧化酶下调发挥抗炎反馈调节。

4. 4.

   甲基化调节剂的差异化效应：

   • •

     chaetocin处理使全球甲基化水平提升(p=0.0052)，CD4⁺T细胞prelamin A平均荧光强度(MFI)降低27.3%，同时使P24⁺细胞比例增加3.1倍

   • •

     RG108虽提高甲基化水平(p=0.0092)，但对prelamin A和HIV再激活无显著影响

机制探讨：

chaetocin通过抑制SUV39H1减少H3K9三甲基化(H3K9me3)，可能通过三种途径发挥作用：

1. 1.

   染色质松弛激活HIV启动子

2. 2.

   上调ZMPSTE24酶促进prelamin A加工

3. 3.

   增强蛋白酶体降解清除异常蛋白

   而DNA甲基化抑制剂RG108作用缓慢，且HIV前病毒CpG位点甲基化在临床样本中较罕见，导致潜伏逆转效果有限。

临床意义：

该研究首次揭示chaetocin同时具备逆转HIV潜伏和改善DNA损伤的双重功能，为开发兼具"激活-清除"和抗衰老功能的组合疗法提供理论依据。特别值得注意的是，8-OHdG与炎症因子的负相关关系提示HIV感染中可能存在独特的氧化应激调控网络，这对理解PLHIV的免疫异常具有启示意义。

研究局限：

横断面设计无法确定因果关系，且样本量较小（n=70病例）。未来需在病毒学失败患者和更长随访周期中验证这些发现，并探索血管紧张素受体阻滞剂(ARB)与HMTi联用的协同效应。