墨西哥罂粟内生真菌枝孢菌中发现的脂氧合酶抑制剂及其抗炎机制研究

研究人员从墨西哥罂粟(Argemone mexicana)中分离出一株内生真菌枝孢菌(Cladosporium ramotenellum) AMEF-14，通过NO、胰蛋白酶、蛋白变性及HRBC稳定化实验证实其提取物具有显著抗炎活性。经柱层析分离后，Fraction 5对脂氧合酶(LOX)展现出最强抑制效果(IC50=24.3±0.88 μg/mL)，动力学分析显示其为非竞争性抑制类型。通过NMR、HRMS、HPLC等技术鉴定活性成分为小檗碱(berberine)，为植物内生真菌作为抗炎生物碱可持续来源提供了新证据。

　　

墨西哥罂粟(Argemone mexicana)作为富含异喹啉生物碱的药用植物，其内生真菌群落蕴藏着独特药理活性。本研究从该植物中成功分离获得一株内生真菌AMEF-14，经显微形态学和分子鉴定确认为枝孢菌(Cladosporium ramotenellum)。科研团队采用多维度评价体系：通过一氧化氮(NO)清除、胰蛋白酶抑制、蛋白变性阻断及人红细胞(HRBC)膜稳定实验，系统验证了该菌株提取物的抗炎潜力。

通过硅胶柱层析获得6个组分中，Fraction 5对促炎关键酶脂氧合酶(Lipoxygenase, LOX)表现出最强抑制活性，半数抑制浓度IC₅₀达24.3±0.88 μg/mL。深入动力学研究发现，该组分存在时酶促反应最大速率V_max从2.776±0.40 μmol/min呈浓度依赖性下降，而米氏常数K_m保持0.0058±1.14 mM不变，揭示其通过非竞争性抑制机制发挥作用。

借助核磁共振(NMR)、高分辨质谱(HRMS)、高效液相色谱(HPLC)等现代分析技术，锁定活性分子为异喹啉类生物碱小檗碱(berberine)，其结构经傅里叶变换红外光谱(FTIR)和紫外光谱(UV)进一步确证。该发现不仅拓展了植物内生真菌次级代谢产物的药用价值谱，更创新性提出将内生微生物作为可持续生产抗炎活性分子的"生物工厂"，为解决传统植物提取受季节限制、资源枯竭等问题提供了绿色替代方案。