CD300f调控小胶质细胞损伤感知与凋亡细胞代谢在脑损伤修复中的关键作用

本研究揭示了免疫受体CD300f通过整合嘌呤能信号(P2RY6)、胞葬作用(efferocytosis)和代谢重编程，调控小胶质细胞对脑损伤后凋亡细胞的识别、清除和降解过程。研究人员采用双光子活体成像、CCI模型和蛋白质组学技术，发现CD300f缺失导致微胶质细胞突触延伸障碍、胞葬功能缺陷及长期运动功能恢复受损，为中枢神经系统损伤修复提供了新的分子靶点。

　　

在复杂的中枢神经系统损伤修复过程中，小胶质细胞作为常驻的免疫哨兵，其精确的损伤感知和凋亡细胞清除能力直接决定神经修复的成败。然而，这些细胞如何整合多种损伤相关分子模式(DAMPs)信号来协调修复反应，始终是神经免疫领域的核心谜题。最新发表在《Brain, Behavior, and Immunity》的研究揭开了这一过程的关键调控者——脂质感应免疫受体CD300f的神秘面纱。

研究团队采用了多维度技术体系：通过CX3CR1^GFP/+转基因小鼠结合双光子活体显微技术，实时观测皮层激光损伤后微胶质细胞动态；建立轻度创伤性脑损伤(mTBI)和皮质控制性冲击(CCI)模型模拟临床病理过程；运用流式细胞术定量凋亡胸腺细胞清除效率；并采用数据非依赖采集(DIA)蛋白质组学解析分子网络。来自乌拉圭共和国大学(UDELAR)和美国国立神经疾病与卒中研究所(NINDS)的合作样本为研究提供了跨地域验证。

研究结果揭示：在"CD300f缺陷不改变基线微胶质细胞形态学"部分，通过三维重建和动态追踪证实CD300f^-/-小鼠静息态微胶质细胞的体积、球形度和过程运动性均与野生型无差异，为后续功能研究奠定基础。"CD300f是损伤感应中微胶质细胞过程招募的必要条件"显示，激光损伤后CD300f^-/-微胶质细胞的突触延伸体积减少42%，Scholl分析显示损伤中心区域投影面积显著降低，证实其损伤感应缺陷。

关键的"CD300f缺陷导致凋亡细胞清除和降解障碍"部分发现：在mTBI模型3小时后，CD300f^-/-微胶质细胞对PI⁺死亡细胞的吞噬指数降低2.3倍；皮层注射凋亡胸腺细胞的流式检测显示吞噬效率下降67%；脉冲追踪实验更揭示CD300f^-/-骨髓源性巨噬细胞(BMDM)在16小时追踪期仍保留83%的凋亡细胞信号，而野生型仅存留35%，表明其溶酶体降解功能严重受损。

深入机制探索部分"CD300f调控嘌呤能信号和代谢通路"通过蛋白质组学发现：CCI损伤24小时后，CD300f^-/-脑组织出现ENTPD6(CD39L2)蛋白水平异常升高(2.1倍)——这种胞外UDP水解酶会降解P2RY6受体的配体；同时自噬相关蛋白(ATG101、AMBRA1)和线粒体质量控制蛋白(MFN1、USP30)表达紊乱，形成"感应-吞噬-降解"连锁缺陷。尽管CD300f^-/-小鼠在CCI后90天表现出28%的皮层保留率增加，但平行杆测试显示其运动协调误差率持续高于野生型，揭示结构与功能恢复的惊人解离。

讨论部分强调，CD300f通过三重机制塑造微胶质细胞的损伤应答：作为磷脂酰丝氨酸(PS)受体直接启动胞葬作用；通过维持P2RY6表达保障嘌呤能信号传导；调控ENTPD6-UDP-P2RY6轴确保损伤信号的时空特异性。这种多层次的调控网络解释了为何CD300f缺陷会导致"形态保留但功能缺陷"的临床相关表型。研究还发现CD300f^-/-小鼠损伤后中性粒细胞(Ly6G⁺)向脑膜的招募减少45%，但血脑屏障完整性(SR101检测)未受影响，提示其免疫功能调节具有精确的区室化特征。

该研究不仅确立了CD300f作为微胶质细胞感官组(microglial sensome)的核心组件，更揭示了免疫受体协调神经修复的代谢-免疫交叉对话机制。在阿尔茨海默病(CD300f表达与Aβ清除相关)和抑郁症(CD300f缺陷小鼠表现焦虑样行为)等多种神经系统疾病中，这一通路可能成为突破血脑屏障的精准干预靶点。正如研究者Hugo Peluffo团队指出的，理解CD300f如何"教导"微胶质细胞区分生理性修剪与病理性吞噬，将是神经免疫领域下一个十年亟待破解的前沿课题。