基于比色环介导等温扩增(LAMP)技术的黑胡椒黄化病病原菌快速检测方法开发

为解决黑胡椒黄化病病原菌(Fusarium solani)快速检测难题，研究人员开发了靶向延伸因子-1α(EF-1α)基因的比色LAMP检测技术。该研究在65°C条件下60分钟即可完成检测，灵敏度达100 pg DNA，对人工接种样本实现100%准确检出，为田间病害监测提供了简便高效的分子工具。

　　

由镰刀菌(Fusarium solani)引起的黄化病严重危害黑胡椒(Piper nigrum L.)种植业，导致显著减产和经济损失。针对该病原菌的快速诊断需求，研究者创新性地建立了比色环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)检测体系。通过精准设计靶向翻译延伸因子-1α(translation elongation factor-1 alpha, EF-1α)基因的特异性引物，在优化反应条件(65°C恒温60分钟)下，实现了100皮克(pg)级DNA的检测限。阳性结果可通过肉眼观察显色变化及琼脂糖凝胶电泳的梯形条带特征进行双重确认。相较于传统PCR技术，该检测方法展现出对F. solani的高度特异性，且无需复杂仪器设备，60分钟内即可获得可视化结果。在人工接种实验中，该方法表现出100%的检测准确率和特异性，为田间病害早期预警和精准防控提供了强有力的技术支撑。