综述：通过液-液相分离调控天然免疫：聚焦兽医病毒

本文系统阐述了液-液相分离（LLPS）在动物病毒复制与宿主天然免疫调控中的核心作用，重点总结了兽医病毒通过操控LLPS拮抗宿主免疫的机制，为开发靶向抗病毒策略提供了新视角。

　　

2 LLPS增强动物病毒的复制与增殖

作为专性细胞内寄生虫，病毒通过高效招募核酸、蛋白质等必需元件在拥挤的胞内环境中大量增殖。研究发现，病毒复制活性位点（如核内病毒复制 compartments（VRCs）、胞质病毒工厂（VFs）及包含体（IBs）的形成均与LLPS密切相关。例如，疱疹病毒立即早期蛋白ICP4通过其内在无序区（IDR）驱动VRCs的液液相分离，促进病毒转录复合体组装；新城疫病毒（NDV）的NP和P蛋白通过LLPS形成胞质包含体，作为病毒RNA合成的场所；狂犬病病毒（RABV）磷蛋白P通过热响应性LLPS形成Negri小体，容纳病毒基因组复制与转录。此外，轮状病毒磷酸化蛋白NSP2通过相分离靶向脂滴界面，优化病毒复制微环境。这些冷凝物不仅浓缩病毒组分，还可能屏蔽宿主免疫识别。

3 天然抗病毒免疫的保守LLPS机制

LLPS通过形成生物分子冷凝物放大天然免疫信号。cGAS识别病毒DNA后发生LLPS，促进cGAMP合成并增强STING-TBK1-IRF3/7通路激活，同时排斥核酸酶TREX1以保护DNA；应激颗粒（SGs）在dsRNA激活PKR-eIF2α磷酸化后组装，整合免疫信号与细胞生存决策；核内PML核体（PML-NBs）通过TRIM蛋白寡聚化发挥抗病毒作用，如猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染中TRIM19依赖α-螺旋CC域促进PML-NBs形成；炎症小体 assembly 亦受LLPS调控，NLRP6与病毒dsRNA发生相分离招募ASC，促进caspase-1激活。这些机制凸显LLPS在免疫应答中的核心地位。

4 病毒对免疫冷凝物的靶向破坏

动物病毒通过多种策略破坏宿主LLPS以逃逸免疫。非洲猪瘟病毒（ASFV）利用DP71L竞争STING的PP1结合位点，抑制IRF3冷凝物形成，同时QP383R诱导cGAS棕榈酰化阻断其LLPS；马立克病毒（Meq）通过空间阻碍TBK1-IRF7招募抑制干扰素产生；口蹄疫病毒（FMDV）蛋白酶L^Pro切割G3BP1/2抑制SGs组装；伪狂犬病毒（PRV）IE180蛋白将G3BP核转位以抑制胞质SGs；SARS-CoV-2 N蛋白与RNA形成冷凝物招募G3BP1，隔离宿主mRNA；多种病毒（如PRRSV、鸡传染性贫血病毒CIAV）通过SUMO化修饰或蛋白酶体途径破坏PML-NBs。这些策略揭示了病毒与宿主在相分离层面的进化军备竞赛。

5 相分离动态的治疗性调控

靶向LLPS为抗病毒治疗提供新思路。蛋白酶体抑制剂MG132可恢复疱疹病毒US3破坏的PML-NBs；IRTKS等免疫增强剂通过强化STING相分离促进干扰素产生；热响应性RABV P蛋白的LLPS特性为局部热疗提供依据；针对保守靶点（如RdRp）设计小分子可避免病毒逃逸。病毒载体优化亦可利用LLPS原理，如AAV2 capsid工程化靶向核仁蛋白提升转导效率；mRNA-LNP疫苗通过抗原冷凝物增强T细胞应答。当前挑战在于精准调控LLPS以平衡抗病毒效应与免疫稳态，需结合AI筛选、结构生物学及多维组学推动靶向药物开发。

6 总结与展望

LLPS研究为病毒-宿主相互作用提供了物理化学视角，虽在兽医病毒领域尚处起步阶段，但其调控机制具有普适性。未来需借助超高分辨率显微技术和跨学科手段解析冷凝物动态，重点挖掘IDR稳定性调控、金属离子介导的相分离修饰及多靶点协同干预策略。通过理性设计靶向冷凝物的小分子（如PARP抑制剂PJ34、硬化剂cyclopamine），或结合CRISPR/RNAi技术，有望开发出特异性抗病毒方案，减轻畜牧业因病毒病造成的巨大损失。