胡桃叶提取物通过调节氧化应激和抗氧化酶活性减轻小鼠脑型疟疾的神经损伤

本研究探讨了胡桃叶提取物（JRLE）对小鼠脑型疟疾（CM）模型中氧化应激及神经保护作用的影响。结果表明，JRLE能显著降低感染小鼠脑组织中的氧化标志物（NO、MDA、H2O2），提升抗氧化酶（CAT、SOD、GSH、TAC）活性，并通过抑制诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达减轻神经炎症。该研究为天然抗氧化剂和抗疟药物的开发提供了新思路。

　　

背景

疟疾是由疟原虫属（Plasmodium）寄生虫引起的严重传染病，其中恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）可导致脑型疟疾（CM），引发高死亡率。小鼠模型中常用伯氏疟原虫（Plasmodium berghei）模拟人类CM病理过程。既往研究表明，胡桃（Juglans regia）叶具有抗氧化、抗炎和神经保护特性，但其在疟疾感染中对氧化应激的调节作用尚未完全阐明。

目的

本研究旨在探究胡桃叶甲醇提取物（JRLE）对感染伯氏疟原虫的小鼠脑组织中氧化应激水平、抗氧化酶活性及神经损伤的影响。

方法

从沙特阿拉伯阿尔巴哈市采集胡桃叶，经甲醇提取后通过气相色谱-质谱（GC-MS）分析其 phytochemical 成分。实验使用30只雌性C57BL/6小鼠，分为六组：对照组、JRLE单独处理组、感染组、感染+低剂量JRLE（250 mg/kg）组、感染+高剂量JRLE（500 mg/kg）组和感染+氯喹（CQ，10 mg/kg）组。感染后第4天开始口服给药，第9天处死小鼠并采集脑组织。通过生化分析检测氧化应激标志物（NO、MDA、H₂O₂）和抗氧化酶（CAT、SOD、GSH、TAC）活性，采用免疫组化和ELISA法测定诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达水平。

结果

GC-MS分析显示JRLE中含有 Resorcinol、Juglone、Squalene、维生素E、Stigmasterol 等多种生物活性成分。感染伯氏疟原虫的小鼠出现显著神经症状（瘫痪、共济失调）和高寄生虫血症（23.84%）。JRLE治疗显著降低寄生虫负荷（500 mg/kg 组降至6.33%），效果仅次于氯喹（3.11%）。感染组脑组织中CAT、SOD、GSH和TAC活性显著下降，而NO、MDA和H₂O₂水平升高。JRLE（500 mg/kg）处理后，CAT活性从0.14 U/g恢复至0.37 U/g，SOD从5.13 U/g升至9.91 U/g，GSH从2.78 mg/g增至3.55 mg/g，TAC从0.25 mM/L提高到0.39 mM/L。同时，氧化标志物NO从23.51 μmol/L降至17.28 μmol/L，MDA从126.49 nmol/g降至100.99 nmol/g，H₂O₂从0.08 mM/g降至0.068 mM/g。免疫组化和ELISA结果显示，感染后iNOS表达显著上调（5.54 U/mg），JRLE治疗将其抑制至1.71 U/mg，表明其通过调控iNOS介导的NO通路减轻神经炎症。

讨论

JRLE通过多种机制发挥抗疟和神经保护作用。其含有的 Squalene、Stigmasterol 和 Lupeol 等成分具有强抗氧化活性，能直接清除自由基，增强内源性抗氧化防御系统。感染过程中，疟原虫增殖导致活性氧（ROS）过量产生，引起脂质过氧化（如MDA升高）和蛋白质损伤，破坏血脑屏障（BBB）并促进寄生虫侵入脑组织。JRLE通过提升CAT和SOD活性，加速H₂O₂和超氧阴离子的清除，减少氧化损伤。此外，JRLE抑制iNOS过度表达，降低NO及其衍生物 peroxynitrite（ONOO-）的神经毒性，从而缓解小脑蒲肯野细胞层和分子层的炎症反应。这些发现与既往研究一致，提示植物多酚类化合物可通过多靶点调节氧化-抗氧化平衡，为开发新型抗疟药物提供了理论基础。

结论

胡桃叶提取物能有效缓解伯氏疟原虫感染引起的小鼠脑氧化应激和神经损伤，其作用与增强抗氧化酶活性、抑制iNOS-NO通路有关。JRLE作为一种天然抗氧化剂和抗疟剂，具有进一步开发为辅助治疗药物的潜力。后续研究应聚焦于分离其特异性活性成分，并深入探索其分子机制。