综述：拓展CAR疗法前沿：CAR-T、CAR-NK、CAR-M和CAR-DC方法的比较洞察

本综述系统比较了CAR-T、CAR-NK、CAR-M和CAR-DC四种细胞免疫疗法的优势与挑战。文章重点探讨了它们在血液恶性肿瘤治疗中的应用潜力，详细分析了各类CAR细胞的结构设计、临床进展及面临的瓶颈问题（如细胞耗竭、抗原逃逸和免疫微环境抑制），为下一代CAR疗法的开发提供了重要理论依据。

　　

拓展CAR疗法前沿：CAR-T、CAR-NK、CAR-M和CAR-DC方法的比较洞察

引言

嵌合抗原受体（CAR）疗法在血液恶性肿瘤治疗中展现出显著的临床疗效，但其广泛应用仍面临治疗耐药性和可及性有限等挑战。为突破这些限制，替代性的CAR细胞疗法包括CAR自然杀伤细胞（CAR-NK）、CAR巨噬细胞（CAR-M）和CAR树突状细胞（CAR-DC）疗法被相继提出。与CAR-T相比，CAR-NK细胞在细胞因子释放综合征（CRS）和神经毒性方面具有更高的安全性，同时具备天然细胞毒性，使其成为有前景的选择。尽管存在这些优势，CAR-NK疗法仍受限于组织浸润不足和转导效率低等问题。CAR-M细胞凭借强大的浸润能力和抗原呈递细胞功能展现出潜力，但面临病毒转导效率不理想的挑战。CAR-DC作为一种极具前景的新兴方法，目前正处于积极研究中。

CAR-T

CAR-T细胞疗法通过对T细胞进行基因修饰，使其表达CAR，从而实现对肿瘤细胞的靶向识别、免疫反应激活和恶性细胞清除。CAR设计是CAR-T疗法的关键部分，其需要比T细胞受体（TCR）更高的亲和力范围，这意味着CAR介导的细胞毒性依赖于更高密度的细胞表面抗原。CAR的优势在于能够调节抗原密度，提供更强的信号强度，并弥补T细胞耗竭的功能缺陷。

CAR-T细胞疗法具有广泛的临床应用，特别是在急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤和多发性骨髓瘤治疗中，其疗效已得到广泛认可。CAR-T研究起步较早，目前有大量临床试验正在进行。早期CAR-T临床试验主要针对血液恶性肿瘤，主要靶点为CD19和BCMA。其中，靶向CD19的CAR-T在B细胞淋巴瘤中显示出比其他靶点更好的结果，而靶向BCMA的CAR-T在多发性骨髓瘤治疗中更为有效。随着临床研究的进展，针对单一抗原的自体CAR-T疗法已无法完全满足临床治疗需求，因此针对多抗原的CAR-T和同种异体CAR-T疗法受到越来越多关注。此外，一些新靶点如GPC-3和BAFFR（NCT05620706）（NCT05370430）已成为CAR-T疗法的有希望的候选靶点。

面临问题

CAR-T细胞疗法在B-ALL和淋巴瘤中的成功应用展示了其在抗肿瘤治疗中的巨大潜力，但仍存在若干挑战，包括CAR-T细胞的免疫抑制肿瘤微环境、细胞毒性等问题，这些也是CAR-T治疗应用的障碍。

CAR-T细胞耗竭与扩增相关挑战

CAR-T细胞疗法的疗效与其在人体内的持久性密切相关，而CAR-T细胞的耗竭和增殖是影响其寿命的重要因素。CAR-T细胞耗竭是指由于持续抗原刺激、CAR共刺激域过度信号传导导致的抗原特异性T细胞功能丧失的状态。体外研究表明，PD-1、Lag3、Tim3、TIGIT和CTLA-4的上调是T细胞耗竭的标志，也是抗肿瘤功能丧失的主要原因。此外，细胞因子、转录因子和表观遗传修饰在CAR-T细胞耗竭的发展中扮演重要角色。IL-5已被证明可降低mTORC1活性，从而增强增殖潜力并减少凋亡；IL-7通过激活STAT5等通路有助于CAR-T细胞在体内的长期持久性。转录因子如TOX、NR4A和c-Jun表达的调节已被发现可提高CAR-T细胞对耗竭的抵抗力。在表观遗传学方面，DNA甲基化是建立稳定基因沉默程序的关键表观遗传机制。T细胞在抗肿瘤反应高峰期间和之后经历从头DNA甲基化，导致与耗竭相关的终末分化。这些表观遗传变化有助于前体耗竭T细胞状态的形成。

为解决CAR-T细胞耗竭和扩增问题，首先是增强CAR-T细胞的增殖和分化活性。研究表明，溶瘤病毒可通过协同效应增强CAR-T细胞在肿瘤中的运输和抗肿瘤活性；此外，CAR-T细胞扩增阶段使用的培养基会影响其在人体中的表现，因此可通过优化培养基来增强CAR-T细胞的增殖和分化能力。另一种方法是添加促进未分化CAR-T细胞产生的细胞因子，如白细胞介素混合物，可影响CAR-T细胞的记忆、增殖和分化能力，从而改善其在体内的持久性。其次是针对CAR-T细胞耗竭过程，首先通过靶向T细胞内在通路来克服耗竭，例如，PD-1的持续表达与CAR-T功能障碍相关，因此可通过内部阻断PD-1来改善CAR-T功能；其次，可通过CAR设计限制或破坏CAR与抗原的相互作用，减弱持续抗原刺激，如诱导"短暂休息"阶段来恢复耗竭T细胞的效应功能。此外，删除CAR T细胞中的DNMT3A已被证明可阻断多个调控人类T细胞分化的关键基因的甲基化，防止CAR-T细胞耗竭并增强抗肿瘤活性。

抗原识别域的免疫原性

目前大多数CAR-T细胞疗法使用鼠源CAR，其被人免疫系统识别为外来物质。这种识别导致单链可变片段（scFv）等抗原识别域的免疫原性，是CAR-T细胞免疫原性和随后耗竭的主要因素。为应对这一挑战，研究人员探索了使用纳米抗体和抗体人源化技术来降低CAR构建体的免疫原性潜力。

纳米抗体来源于重链抗体（VHH）的可变域，最早由Hamers-Casternans等在单峰骆驼中发现，随后在骆驼科和鲨鱼中被广泛发现。然而，scFv通常表现出稳定性受损和抗原亲和力降低，且易于聚集或错误折叠。这些限制可能源于结构问题，如可变轻链（VL）域的低折叠稳定性以及可变重链（VH）和VL域界面疏水残基的暴露。纳米抗体完全缺乏VL和恒定域，具有构象稳定性，并保持与scFv相当的结合能力、特异性和溶解度。此外，它们更不易聚集和错误折叠，且其与人类VH基因家族III的高度序列相似性使其免疫原性更低，更适合临床应用。而且，纳米抗体通常只需进行微小序列修改即可实现人源化。在评估双可变重链域VHH（dVHH）NS7CAR-T的临床前试验中，该构建体显示出对CD7的高特异性、增强的增殖能力，以及与基于scFv的CD7靶向CAR-T疗法相比降低的与其他蛋白质的交叉反应性。临床阶段观察到良好的安全性特征，80%患者仅出现轻度CRS，与基于scFv的NS7CAR-T治疗报道相似。

源自鼠源的CAR和来自骆驼科的纳米抗体都是非人源的。非人源抗体可能引发人体免疫反应，潜在地影响治疗效果。为解决这一问题，研究人员采用了抗体人源化技术。常见策略包括基于框架区（FWR）同源性的互补决定区（CDR）移植、种系人源化和使用IgG衍生序列，方法选择取决于具体应用。人源化技术能够优化抗体特性，包括免疫原性、特异性和亲和力。研究人员还开发了通用人源化纳米抗体支架，通过CDR移植在保持结构稳定性的同时获得抗原特异性和亲和力。研究表明，人源CAR-T在治疗复发/难治性B-ALL方面比鼠源CAR-T细胞疗法具有更好的长期疗效，人源组的完全缓解（CR）率为75%，优于鼠源组。值得一提的是，人源化CAR-T可在鼠源CD19 CAR-T治疗后复发或失败后作为挽救疗法使用。

抗原逃逸

抗原逃逸是肿瘤逃避免疫监视的常见方法之一。临床证据表明，一些接受CAR-T细胞治疗急性B淋巴细胞白血病的患者会出现CD19阴性白血病复发，特别是那些具有长期CAR-T细胞的患者。CD19阴性导致CD19靶向CAR-T细胞失效，这种现象称为抗原逃逸。研究发现，肿瘤细胞中的抗原逃逸与几种CD19剪接变体的表达相关，如△exon-2和△exon-5/6，这些变体缺乏CD19的跨膜域，从而逃避CAR-T细胞的识别。CAR诱导的免疫压力促进这些剪接变体的选择性表达，使肿瘤细胞能够逃避CAR-T细胞监视。另一种临床观察到的抗原逃逸机制是谱系转换，常见于混合谱系白血病（MLL）患者在CAR-T细胞治疗后发展为急性髓系白血病（AML）。这种现象可能与KMT2A重排相关。

面对抗原逃逸，一种策略是同时靶向目标细胞表面的多个抗原。许多临床试验研究了同时靶向两个抗原的CAR-T细胞（如NCT05438368、NCT05437341、NCT05437328），即使一个抗原发生逃逸，也能保持治疗效果。此外，CAR分子可被设计为同时识别多个抗原，即"串联CAR"。研究表明，同时靶向HER2和IL13Rα2的串联CAR T细胞与单分子CAR相比，表现出增强的抗肿瘤活性和治疗效力。另一种策略是提高CAR-T细胞对低抗原密度靶标的反应性。研究表明，CAR的活性受抗原密度影响，在CAR中加入额外的免疫受体酪氨酸基激活基序（ITAM）可改善对低抗原密度肿瘤细胞的识别。此外，CD19 CAR-T细胞对耐药性低抗原密度肿瘤反应减弱的原因是CAR信号传导不足。增强CAR信号强度可提高CD19 CAR-T细胞对此类肿瘤的有效性。例如，CAR-T细胞疗法联合可增加靶抗原表达的药物，除了直接去甲基化淋巴瘤细胞以抑制肿瘤生长外，地西他滨（DAC）还可上调淋巴瘤细胞上的CD19表达；bryostatin 1可上调CD22表达，以增强CD22 CAR-T的效果或防止肿瘤细胞表面CD22低表达。或者，可通过改变CAR的亲和力来降低CAR的密度阈值，特别是增强ScFv对其靶标的亲和力。

免疫抑制微环境

免疫抑制微环境（TME）是指肿瘤所在的内部环境，主要由肿瘤细胞、基质细胞（如癌症相关成纤维细胞）、免疫细胞及其分泌因子、血管内皮细胞和细胞外基质（ECM）组成，是一个复杂的集成系统。这些免疫抑制成分与恶性细胞密切相互作用，促进其生存和免疫逃逸。同时，它们损害CAR-T细胞的抗肿瘤功效，导致CAR-T细胞耗竭。

目前，在克服TME阻碍CAR-T疗法方面尚未取得突破；然而，几种有前景的策略仍在探索中。首先是靶向TME中的免疫抑制细胞。关键免疫抑制成分包括调节性T细胞（Tregs）、肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）和髓源性抑制细胞（MDSCs）。对于Tregs，敲除CD74已被证明可特异性减少其在TME内的浸润，从而促进CAR-T细胞在肿瘤中的浸润和积累。研究表明，阻断CD47/SIRPa和CD24 SIGLEC-10信号可有效促进TAMs对肿瘤细胞的吞噬作用。其次是通过开发分泌免疫刺激细胞因子的装甲CAR-T细胞来调节微环境，如分泌白细胞介素IL-12、IL-18或IL-15的武装CAR-T细胞。第二种是调节代谢失调的策略，利用代谢途径促进记忆T细胞的形成或通过营养受限的TME逆转效应功能，这在临床试验中显示出对CAR-T细胞肿瘤控制的有希望改善。Morgane Boulch等人通过研究CAR4和CAR8 T细胞在TME中的不同作用，提出了一种加深T细胞与微环境相互作用并利用与其相互作用的细胞因子的方法。

CAR-T细胞的毒性

CAR-T细胞疗法可能导致免疫反应过度激活，从而引发细胞因子释放综合征（CRS）。CAR-T细胞在与其靶抗原结合后迅速激活，导致大量颗粒酶B、穿孔素、IFN-y和TNF-a的分泌。颗粒酶B激活细胞与Gasdermin E（GSDME）的广泛表达相关，后者诱导细胞焦亡并促进损伤相关分子模式（DAMPs）的释放。DAMPs被模式识别受体（PRRs）识别并触发巨噬细胞激活。当前研究已确定L-6、IL-10和IFN-y为CAR-T细胞相关CRS的关键细胞因子，其中IL-6是核心介质。IL-6及其下游效应子在CRS期间临床症状的发展中扮演重要角色。升高的IL-6水平可诱导凝血级联反应，导致弥散性血管内凝血和心肌功能障碍。此外，巨噬细胞和CAR-T细胞的共定位涉及CD40L-CD40相互作用，直接诱导IL-6产生。这表明存在潜在的CAR-T细胞-巨噬细胞调节轴。

为预防和治疗CRS，可采用靶向参与CRS发病机制的细胞因子如白细胞介素IL-1和IL-6的治疗策略。例如，IL-1是参与CRS的重要细胞因子，因此可使用IL-1受体拮抗剂Anakinra在一定程度上治疗CRS。类似地，CRS主要由IL-6介导，IL-6受体拮抗剂在缓解这种状况方面已显示疗效。研究表明，CRS的严重程度与肿瘤负荷呈正相关，因此可在CAR-T细胞输注前使用传统放疗和化疗来减少肿瘤负荷并预防CRS。

CAR-NK

CAR-T细胞面临的各种挑战促使人们对使用其他免疫细胞进行CAR疗法的兴趣日益增加，特别是自然杀伤（NK）细胞。NK细胞无MHC限制，可非特异性地杀死肿瘤细胞，表现出强大的抗肿瘤活性。与CAR-T细胞相比，CAR-NK细胞具有一些显著优势，如更好的安全性，特别是在CRS和神经毒性方面。CAR-NK细胞不仅具有固有的杀死肿瘤细胞能力，还可通过CAR设计识别广泛的肿瘤细胞类型。这尤其有利，因为NK细胞受体可识别多种肿瘤细胞上存在的配体，从而使CAR-NK细胞疗法成为具有巨大治疗潜力的有前景方法。

CAR-NK细胞的结构与CAR-T细胞相似，但通常使用更适合NK细胞的共刺激因子。例如，CD244的上调可增强NK细胞的信号增强能力及其对肿瘤细胞的天然毒性。此外，DAP12和DAP10参与NK细胞信号传导，因此CAR-NK细胞可被设计为整合这些信号分子。研究表明，基于DAP12的CAR-NK细胞比基于CD3的CAR-NK细胞表现更好，后者与CAR-T相似。

临床试验

目前，CAR-NK主要针对血液恶性肿瘤进行临床研究探索，包括B淋巴细胞白血病和多发性骨髓瘤。但大多数仍处于实验阶段，结果尚未公布。这些研究中最常见的靶点是CD19，主要用于B细胞淋巴瘤；第二常见靶点是BCMA，主要用于多发性骨髓瘤治疗。其中还有用于B细胞非霍奇金淋巴瘤的CD19/CD70双特异性（NCT0566715）（NCT05842707）；用于多发性骨髓瘤的BCMA/GPRC5D双特异性（NCT06594211）；以及用于急性髓系白血病的CD33/CLL1双特异性（NCT05215015）。例如，在一项针对R/R大B细胞淋巴瘤的4-1BB共刺激CD19特异性CAR-NK细胞疗法的1期剂量递增试验中，对8名患者重复施用CAR-NK细胞。客观缓解率（ORR）为62.5%，完全缓解（CR）率为50%。37.5%患者观察到3级发热性中性粒细胞减少症，50%患者出现3级血小板减少症。重要的是，未报告长期或延迟血细胞减少病例。研究还表明，需要高剂量、重复给药以获得更好的抗肿瘤疗效。此外，一项评估CD33靶向CAR-NK细胞疗法在R/R AML患者中安全性和有效性的1期临床试验显示，与CAR-T相比，CD33 CAR-NK具有更有利的安全性特征，并有助于减轻与NK细胞增殖有限相关的副作用。但持久性需要进一步提高。微小残留病阴性完全缓解（MRD-CR）率为60%。此外，70%患者在首轮CAR-NK细胞输注后2天内出现发热，除血液学毒性外未观察到3级以上不良事件（AEs）。

优势

与CAR-T细胞相比，CAR-NK具有双重肿瘤细胞杀伤机制，可有效杀死一些不表达CAR识别特异性抗原的肿瘤细胞。CAR-NK细胞保留其固有细胞毒性，使其能够通过自然机制杀死肿瘤细胞。同时，它可通过CD16发挥ADCC作用杀死肿瘤细胞。CAR-NK细胞在人体内寿命较短，且与损伤健康组织的较低风险相关。此外，CAR-NK细胞不太可能诱发CRS，因为其细胞因子分泌不同。NK细胞主要分泌IFN-y；CAR-T细胞分泌IL-1a、IL-1Ra、IL-2、IL-2Ra、IL-6、TNF-α、MCP-1、IL-8、IL-10和IL-15，这些都是与CRS高度相关的细胞因子。

面临问题

CAR-NK细胞相对较短的寿命有助于其在人体内的安全性，降低损伤正常组织的可能性。然而，与此同时，CAR-NK的有限持久性也在一定程度上限制了CAR-NK细胞疗法的疗效。为增强CAR-NK细胞在体内的疗效，需要外部细胞因子辅助。但这也会带来副作用，如抑制调节性T细胞。

肿瘤靶向效率低

低肿瘤靶向效率一直是CAR细胞疗法的挑战。肿瘤微环境显著导致CAR-NK细胞在肿瘤组织中的靶向效率低。首先，TME中的免疫抑制信号抑制NK细胞对肿瘤细胞的清除。除肿瘤和基质细胞外，TME中的各种免疫细胞，如TAMs、调节性T细胞和中性粒细胞，释放免疫抑制物质，阻碍NK细胞的抗肿瘤效果。其次，TME中营养物质的可用性差进一步阻碍NK细胞清除肿瘤的能力。这是因为爆炸性肿瘤生长导致的氧气和营养物质耗竭形成缺氧和营养缺乏的TME，损害NK细胞的正常功能。除了抑制NK细胞清除外，TME还影响检查点分子与CAR-NK细胞的相互作用。当前策略主要涉及通过基因编辑从NK细胞中移除检查点成分。研究表明，删除检查点成分可有效增强CAR-NK细胞的抗肿瘤活性。

慢病毒转导效率低

慢病毒转导是CAR细胞疗法中基因修饰和递送的广泛应用方法。然而，NK细胞对病毒感染的固有抵抗力对在CAR-NK细胞疗法中实现慢病毒转导的高效性提出了挑战。目前使用化学品提高转导效率，如硫酸鱼精蛋白或可去除细胞膜上电荷以增强转导效率的聚合物。在造血干细胞和祖细胞中，使用环孢素A和雷帕霉素来克服慢病毒限制屏障。

CAR-M

巨噬细胞是专门的吞噬和抗原呈递细胞。它们分为M1和M2两种类型。M1巨噬细胞在TME中发挥促炎作用，并在抗肿瘤中起主要作用，而M2巨噬细胞促进肿瘤转移、生存和生长。诱导M2巨噬细胞极化为M1巨噬细胞可能逆转肿瘤微环境。因此，除CAR-T和CAR-NK外，CAR-M应运而生，具有解决CAR-T和CAR-NK困难的潜力。

由于巨噬细胞的功能不同，CAR-M中CAR的构建与CAR-T和CAR-NK略有不同。CAR-M中的CAR构建体主要由靶向相应分子的scFv、CD8铰链和跨膜域以及CD3胞内域组成。对于巨噬细胞功能，Morrissey及其同事引入了不同的胞质域。其中，由Megfl0和FcRy域组成的CAR在吞噬抗原标记物方面显示效力，而Bail和MerTK域未能诱导巨噬细胞的吞噬活性。此外，研究人员还尝试使用炎症信号域，希望产生促炎效果，可诱导M2巨噬细胞向M1巨噬细胞转化。例如，将TLR4和TLR2的细胞内信号域整合到CAR框架中可促进巨噬细胞产生CD86、MHC-II和TNF-α，并加速肿瘤消退，这些都是M1巨噬细胞产生的特征。至于CD3ξ胞内域，过去主要用于CAR-T细胞中CAR的构建，但由于其优异的信号转导能力，现在也广泛用于CAR-M细胞中CAR的构建。CAR-M CAR已发展到第二代，由诱导多能干细胞构建，具有结合CD3C和TLR4的胞内域。此外，它已被证明具有增强肿瘤细胞清除和调节肿瘤环境的能力。

优势

巨噬细胞是TME中最丰富的浸润免疫细胞。肿瘤周围ECM形成的物理屏障是影响免疫细胞浸润的最重要因素。ECM由高度组织的纤维分子、糖蛋白和其他大分子组成。其合成和降解主要受基质金属蛋白酶（MMPs）和金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）调节，MMP可降解ECM，TIMP是抑制MMP活性的重要酶家族。巨噬细胞是MMP的主要来源，这使其比T细胞和NK细胞具有更强的浸润ECM能力。这赋予CAR-M细胞疗法优势。利用这一点，Zhang等人设计了一种CAR-M，由靶向HER2的细胞外scFv区和细胞内激活的CD147组成，可触发HER2阳性靶细胞激活的CD147域下游信号通路，从而促进MMP的产生，甚至进一步促进T细胞的浸润，而CAR-M细胞的吞噬和炎症细胞因子分泌不受影响。

除吞噬功能外，巨噬细胞还可作为抗原呈递细胞。此外，CAR-M还可作为抗原呈递细胞增强T细胞的毒性作用。与CAR-T细胞相比，CAR-M细胞在体内循环时间更短，非肿瘤毒性更低，使其不太可能诱发CRS。IL-6是可能触发CRS的细胞因子，而CAR-M细胞产生IL-6，有趣的是，出现了两种不同结果：用CAR-147巨噬细胞治疗的小鼠IL-6水平低于对照组，而CAR-iMac细胞显示IL-6产生升高。具体原因需要进一步研究。

面临问题

作为免疫细胞，巨噬细胞也面临病毒转导效率低的问题。目前主要使用腺病毒载体和Vpx修饰的慢病毒进行转导，这可在一定程度上克服巨噬细胞转导CAR效率低的问题。CAR-M细胞还面临扩增问题。巨噬细胞在体外或体内注射后不增殖，因此患者体内CAR-M细胞数量有限。这种限制可能影响治疗效果。此外，巨噬细胞在体内的迁移特性也会影响疗效。当CAR-M细胞在体外注射时，它们最初倾向于穿过肺部，然后主要驻留在肝脏。此外，CAR-M细胞数量有限进一步限制了其有效性。

临床试验

目前，仅进行了有限数量的CAR-M临床研究，已确定七项，其中六项针对实体瘤。剩余一项针对血液肿瘤复发/难治性TCL，分为两部分。第一阶段评估靶向CD5的CAR-M药物MT-101的安全性、耐受性和适当剂量；第二阶段基于第一阶段的比较实验评估MT-101的安全性、耐受性和有效性（NCT05138458）。该临床试验正在进行中，预计于2025年10月完成。CAR-M在血液恶性肿瘤中的临床研究很少，需要更多试验进一步研究CAR-M的抗肿瘤活性、治疗效果和安全性。

CAR-DC

DC细胞是体内最强的抗原呈递细胞，人体内大多数DC处于未成熟状态。这些细胞具有高迁移能力和抗原吞噬能力，使其能够有效吸收、加工和呈递抗原。摄取抗原后，这些细胞分化为成熟DC。在成熟过程中，DC可从暴露抗原的外周组织迁移到次级淋巴器官，与T细胞接触，并引发免疫反应，包括诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）。

体外DC细胞主要来源于自体单核细胞以生成DC。负载CAR的DC能够特异性靶向癌细胞，吞噬细胞，呈递抗原并诱导T细胞免疫反应。目前认为具有靶向多种癌症的潜力；然而，目前尚未发表相关研究。

CAR-DC的临床试验仍处于实验阶段。有一项针对血液恶性肿瘤：CAR-T和CAR-DC靶向CD19联合治疗复发和难治性B淋巴瘤（NCT05585996）。

结论

本综述概述了当前CAR细胞疗法，包括其设计、进行中的临床试验、应用以及在血液恶性肿瘤中的策略考虑。此外，对CAR-M、CAR-NK和CAR-T疗法的比较分析突出了它们各自在临床应用中的优势和挑战。尽管CAR-T细胞疗法在血液恶性肿瘤中广泛应用，但仍面临许多问题，如抗原逃逸、细胞自身耗竭和扩增等。相比之下，CAR-NK和CAR-M疗法展现出有希望的潜力：CAR-NK提供更好的安全性和天然细胞毒性，而CAR-M在肿瘤微环境浸润和抗原呈递方面表现优异，与CAR-NK相似但具有增强的毒性。然而，CAR-NK和CAR-M都面临归巢效率和病毒转导等障碍。

展望未来，CAR-DC疗法由于树突状细胞的抗原呈递能力而具有理论前景，尽管其疗效需要在实验研究中进一步验证。随着CAR细胞疗法的持续快速发展，利用跨学科的技术创新将是克服当前挑战和提升癌症患者治疗效果的关键。

总之，CAR细胞疗法代表了一个蓬勃发展的领域，从开创性的CAR-T到最近的CAR-NK、CAR-M和CAR-DC疗法的发展。持续的跨学科努力有望克服现有障碍，为血液肿瘤及其他领域的治疗带来重大进展。