膳食2型抗性淀粉（RS2）与d-法戈明（FG）协同延缓高脂饮食诱导大鼠代谢紊乱的机制研究

本刊推荐：本研究深入探讨了高脂饮食（HF）诱发代谢紊乱的机制，并评估了2型抗性淀粉（RS2）与d-法戈明（FG）的干预效果。结果表明，RS2（15%）和FG（0.1%）均可降低附睾脂肪积累、血浆甘油三酯（TAG）及氧化应激水平；RS2在改善糖耐量（OGTT）、调节肠道菌群和短链脂肪酸（SCFA）方面表现更优，而FG需更长时间显现效应。研究为膳食纤维类物质在肥胖及相关代谢疾病防治中的应用提供了重要实验依据。

　　

引言

西方饮食模式富含高能量密度食物和饱和脂肪，同时缺乏膳食纤维，这种饮食结构易导致肥胖、非酒精性脂肪肝病（NAFLD）、动脉粥样硬化性血脂异常、高血压、糖调节受损和2型糖尿病等一系列心脏代谢紊乱。此类饮食还会引发慢性氧化应激、低度慢性炎症和肠道菌群失调。氧化应激发生在氧化剂（如活性氧自由基ROS和活性氮自由基）的产生超过机体抗氧化防御能力时，会导致氧化还原信号受损和生物分子氧化损伤。氧化应激与炎症密切相关，后者涉及ROS、细胞因子、趋化因子、黏附分子和类二十烷酸等多种介质的增加。类二十烷酸是一类氧化的脂质介质，能够影响细胞稳态。在氧化应激和炎症刺激下，多种类二十烷酸可通过非酶和酶促途径从n-3和n-6系列的20碳多不饱和脂肪酸（PUFA）生成，其中源自n-6 PUFA的类二十烷酸通常具有促炎特性。

饮食在塑造肠道菌群的组成和功能方面起着关键作用，不同的饮食模式会导致微生物群落的显著变化。西方饮食与微生物多样性减少和有害细菌增加有关。相反，富含纤维的饮食（如地中海饮食）支持有益细菌的生长并增加微生物多样性。改变的肠道菌群可通过影响细菌代谢物（如短链脂肪酸SCFA）的产生，以及促进低度慢性炎症和氧化应激水平升高来影响代谢健康。

淀粉是一种葡萄糖聚合物，是植物的能量储存形式，在动物消化系统中被酶分解成葡萄糖单位以供吸收。其消化性分为三类：快速消化淀粉、缓慢消化淀粉和抗性淀粉（RS）。RS被认为是一种膳食纤维，因为它几乎完整地到达大肠，并被常驻微生物消化和代谢。RS根据其在小肠中消化酶的可及性分为五类。此外，基于肠道菌群功能，还提出了RS的新分类方法，包括根据发酵速率（快速发酵、缓慢发酵或不发酵）、产生的代谢物类型（丁酸、丙酸或乙酸促进剂）、能够处理它们的细菌群数量（高度特异性或较低特异性）以及它们优先促进的门（拟杆菌门、厚壁菌门或放线菌门促进剂）。

常规食物淀粉会迅速分解为葡萄糖，引起血糖急剧上升、胰岛素分泌和可能的低血糖。这些高低循环的重复会促进肥胖，而肥胖是胰岛素抵抗和2型糖尿病发展的关键因素。相比之下，RS可能是预防或延缓胰岛素抵抗及相关疾病发生的有效策略，它通过降低食物的血糖指数和热量值，以及调节肠道菌群和产生可能有益的SCFA来实现。西方国家的RS膳食摄入量为每天3–9克，而较高的消费量（约15克/天）被认为有助于促进胃肠道健康和改善胰岛素敏感性。2型抗性淀粉（RS2）是一种天然存在的淀粉形式，具有颗粒结构，不易被消化酶和淀粉酶接触。与其他需要额外加工或与其他膳食成分相互作用的RS不同，RS2天然形成致密、富含直链淀粉的颗粒，能够抵抗消化。它存在于高直链淀粉玉米、生土豆和青香蕉中，通常被用作功能性成分，被归类为缓慢发酵淀粉。每天摄入15–30克高直链淀粉玉米的RS2可改善肥胖男性的胰岛素敏感性，在超重或肥胖情况下促进体重减轻，并在NAFLD患者中每天摄入40克降低肝脏甘油三酯（TAG）。在之前的啮齿动物研究中，RS在饲料中的添加水平为10%至30%，以评估其生理效应。引发其功能效应所需相对较高量的RS可能难以被普通消费者接受。含有高达20%高直链淀粉玉米RS2的面包保持了其品质（比容、 crumb 孔隙率和质地）和可接受性，而含有30% RS2的面包则呈现 altered 性质和低可接受性。

另一种具有潜在纤维样效应的分子是d-法戈明（FG，(2R,3R,4R)-2-羟甲基哌啶-3,4-二醇；1,2-二脱氧野尻霉素）。FG首先从荞麦（Fagopyrum esculentum Moench）中分离出来，是一种葡萄糖类似物，因为其饱和六元环中3、4和6位羟基的空间构型与d-葡萄糖匹配。与d-葡萄糖不同，FG由于在异头碳位置包含氮原子而抵抗代谢降解。FG是一种温和的体外糖苷酶抑制剂，当与蔗糖或淀粉一起给药时，它能特别有效地降低餐后血糖浓度。此外，FG已被证明可以改变某些肠道微生物的种群，这可能与其结构类似于葡萄糖和甘露糖的抗粘附活性有关。这两种活性（糖苷酶抑制和细菌粘附/抗粘附）可能是FG对抗不同心脏代谢风险因素的体内效应背后的原因。

基于这些原因，我们在此比较了高直链淀粉玉米RS2（按饲料重量计15%）和FG（0.1%；最小活性剂量）在高脂饮食诱导的肥胖和糖尿病前期大鼠模型中对心脏代谢紊乱发生和/或发展的潜在预防作用。

实验部分

动物实验与饮食

一组47只雄性Wistar-Kyoto（WKY/NHsd）大鼠，购自Envigo（现为Inotiv，Indianapolis, IN, USA），在受控环境条件下（湿度60%，温度22±2°C，12小时光/暗循环）每笼三只分组饲养。选择WKY大鼠作为饮食诱导肥胖和胰岛素抵抗的模型，因为它们比其他品系（如Sprague-Dawley大鼠）更容易迅速出现糖耐量受损。为尽量减少昼夜节律干扰，所有程序均在上午进行。

动物喂养实验持续10周，采用随机分配策略将9-10周龄的动物分为四组（每组n=11-12）：标准（STD）组喂食标准饮食（2014 Teklad Global 14% Protein [Envigo (现为Inotiv), Indianapolis, IN, USA]），高脂（HF）组喂食HF饮食（TD.08811，45% kcal来自脂肪[Envigo (现为Inotiv), Indianapolis, IN, USA]），一组喂食含有15%高直链淀粉玉米RS2（按饲料重量计）的HF饮食（高脂+15%高直链淀粉玉米抗性淀粉2型[HF+RS]），以及一组喂食含有0.1%荞麦FG（按饲料重量计）的HF饮食（高脂+0.1%荞麦d-法戈明[HF+FG]）。详细的饮食组成概述在表S1中。RS2（HYLON VII PCR）由Ingredion（Hamburg, Germany）提供。FG（纯度>98%）由Bioglane SLNE（Barcelona, Spain）生产，并由Taihua Shouyue (HK) International Co. Ltd.（Hong Kong, China）慷慨提供。15%的高直链淀粉玉米RS2剂量反映了先前大鼠研究中使用的最高量，表明在此范围内可以观察到有益代谢效应同时保持良好的耐受性。0.1% FG剂量对应于报道的最小活性剂量（2 mg/g碳水化合物）。

所有实验动物协议均严格按照欧洲联盟关于实验室动物伦理护理和使用的指南（指令2010/63/EU）执行。动物实验的正式授权由加泰罗尼亚当局根据许可证编号10090授予，并得到了西班牙国家研究委员会（CSIC）生物伦理问题小组委员会的明确批准。

剂量和给药细节报告

大鼠自由摄取各自的实验饮食10周。饮食通过标准 Chow 喂养口服给药，确保自愿 consumption。给药频率为每日摄入，模拟长期饮食干预。

先前的研究表明RS2和FG通常耐受性良好，并且有益于肠道健康。

大鼠特征与样本收集

每周监测体重和食物摄入量。通过使用Atwater因子估算代谢能来计算能量摄入，分配4 kcal/g给蛋白质，9 kcal/g给脂肪，4 kcal/g给可用碳水化合物（RS除外，其使用因子为2.8 kcal/g RS）。在第5周和第6周期间，将大鼠单独置于代谢笼中过夜，以记录个体饲料和水摄入量以及粪便和尿液排泄数据。在第6周和第9周通过腹部按摩收集粪便样本，然后迅速冷冻并储存在-80°C。在研究第6周和第10周，从禁食大鼠的隐静脉采集血液样本。血浆通过在4°C下以1300×g离心5分钟分离，并储存在-80°C。

在第10周期间，大鼠禁食过夜，然后腹腔内麻醉，使用氯胺酮（Merial Laboratorios, Barcelona, Spain）和甲苯噻嗪（Química Farmacéutica, Barcelona, Spain）组合，剂量分别为80和10 mg/kg体重。麻醉后，通过向腹膜腔内注射40 mL冰镇无菌PBS（pH 7.2）收集腹膜巨噬细胞。腹部按摩后，吸取细胞悬浮液，离心，并重悬于含有10%胎牛血清（FBS；PAA, Pasching, Austria）和100 IU/mL链霉素-青霉素（Sigma；DMEM+G-FBS）的冷DMEM+GlutaMAX培养基（Invitrogen, Paisley, UK）中。

在心脏仍在跳动时通过心脏穿刺收集血液，确保放血。立即分离血浆并储存在-80°C。取出组织，包括盲肠、肝脏和附睾白色 adipose 组织（PAT），称重，立即在液氮中冷冻，然后储存在-80°C。部分肝脏和PAT在4%甲醛中固定24小时。

血糖状态、血脂谱和转氨酶

在第4周和第8周对禁食动物进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）。在使用口服葡萄糖（1 g/kg体重）后0、15、30、45、60、90和120分钟测量血糖，使用酶电极法和Ascensia ELITE XL血糖仪（Bayer Consumer Care AG, Basel, Switzerland）。

在第6周和第10周测量禁食动物的血糖和血浆胰岛素。使用上述相同的酶电极法测定血糖。使用大鼠/小鼠ELISA试剂盒（Millipore Corporation, Billerica, MA, USA）测量血浆胰岛素。使用公式：空腹胰岛素（μU/mL）×空腹血糖（mmol/L）/22.5计算胰岛素抵抗的稳态模型评估（HOMA-IR）指数。胰岛素单位（IU）使用因子1 IU = 0.0347 mg胰岛素进行转换。在第10周对禁食动物通过分光光度法使用商业试剂盒（Spinreact, Girona, Spain）在COBAS MIRA自动分析仪（Roche Diagnostics System, Madrid, Spain）上测量糖化血红蛋白（HbA1c）。在第6周和第10周，还在禁食动物中分析了血浆TAG和胆固醇，并在第10周评估了低密度脂蛋白胆固醇（LDLc）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLc）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT），使用相同的方法。

粪便微生物群的DNA提取和测序

如先前所述进行DNA提取和测序。简而言之，使用QIAamp DNA Stool Mini Kit（QIAGEN, Hilden, Germany）从第9周收集的粪便中提取总DNA，并在Nanodrop 8000分光光度计（ThermoScientific, Waltham, MA, USA）中测量。然后，稀释DNA样本，使用有限循环PCR扩增16S核糖体RNA（rRNA）基因的V3–V4区域，使用以下通用引物：

正向引物：5′ TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAGCCTACGGGNGGCWGCAG 3′

反向引物：5′ GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAGGACTACHVGGGTATCTAATCC 3′

两个来自ZymoBIOMICS的细菌模拟群落DNA样本用作测序和下游程序的对照。测序在Illumina MiSeq上进行，使用2×300 bp reads和v3化学，加载浓度为10 pM，在巴塞罗那基因组调控中心基因组学单元进行。

测序分析

使用R包Phyloseq（版本1.36.0）在R版本4.1.0中分析16S rRNA操作分类单元计数。使用DESeq2包（版本1.32.0）中的Wald检验评估分类群相对丰度的统计显著性。此外，使用R包microbiome（版本1.13.12）计算估计 within-sample α-多样性的指数，包括丰富度（即Chao1指数）、均匀度（即Pielou's和Bulla's指数）、优势度（即Simpson's、Berger–Parker's和Relative指数）、稀有度（即对数模偏度指数）和多样性（即Inverse Simpson's和Gini's指数）。使用R包Phyloseq和vegan（版本2.5.7）计算 between-sample β-多样性（即未加权和加权Unifrac距离的主坐标分析）及其组间统计显著性（使用Adonis的Permanova分析）。

短链脂肪酸

在第6周和第9周干预后的粪便样本中，以及研究结束时（第10周）的盲肠内容物中，使用带有火焰离子化检测器的气相色谱法测量SCFA，方法如前所述。

组织学分析

福尔马林固定的PAT和肝脏样本经过处理，苏木精-伊红染色切片由单盲病理学家检查，方法如别处所述，并按照表3和表4中所示进行分级。

氧化应激

硝酸根阴离子（NO₂^?），一氧化氮（NO）的稳定副产物，通过Griess反应的改进版在冻干尿液（第5-6周获得）中进行分光光度法测量，方法如前所述。

在第10周分离腹膜巨噬细胞，并随后通过二氯荧光素 assay 测量细胞内ROS的基础产生，方法如前所述。使用梯形法计算曲线下面积（AUC）（荧光单位/2.5×10⁴ cells per 100 mL per 120 min）。

内源性抗氧化剂，包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和谷胱甘肽还原酶（GR），在红细胞、PAT和肝脏中测定，方法如前所述。谷胱甘肽，包括还原型（还原型谷胱甘肽[GSH]）和氧化型（氧化型谷胱甘肽[GSSG]）形式，按照既定方案在血浆、PAT和肝脏中进行定量。

使用硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）和丙二醛（MDA）加4-羟基烯醛（4-HAE）测定法评估脂质过氧化副产物。如前所述测量血浆、红细胞和PAT中的TBARS，并进行了一些修改。如前所述测量肝脏中的MDA+4-HAE。

为了标准化氧化应激参数，如前所述测量血液血红蛋白（Hb）和组织蛋白质。

类二十烷酸

如前所述测量肝脏类二十烷酸，并进行了一些小的修改，使用ACQUITY UPLC系统 coupled to a Xevo TQ-S micro 质谱仪，配备BEH C18柱（1.7 μm, 2.1 × 100 mm），由Vanguard预柱（1.7 μm, 2.1 × 5 mm）保护，并保持在45°C（Waters, Milford, MA, USA）。流动相为（A）0.1%乙酸和（B）乙腈/异丙醇混合物（90:10, v/v），流速为0.6 mL/min。洗脱梯度从25% B开始，从1.00到8.00分钟线性增加从25%到95% B，在95% B保持0.50分钟，并从8.51到10.00分钟重新平衡。注入10微升样品。使用负模式下的多反应监测方法进行分析（表S2）。在归一化到相应的内标后，使用相应的外标曲线（Cayman Chemical, Ann Arbor, MI, USA）对类二十烷酸进行定量。

统计分析

使用SPSS v.26软件（IBM, Chicago, IL, USA）进行统计分析。使用Shapiro-Wilk检验评估数据的正态分布，如果数据呈正态分布，则通过单因素方差分析和Tukey多重比较检验确定统计显著性，或通过非参数数据的Kruskal-Wallis检验和Mann-Whitney U检验确定。结果以均值及其标准误（SEM）表示，组织学结果除外，组织学结果以频率（%）或中位数和第25-75百分位数表示。当p值≤0.05时认为差异具有统计学显著性，当p值≤0.1时认为有趋势。

结果

大鼠特征

HF组的体重在干预6周后高于STD组观察到的值，并一直维持到结束（第10周），而HF+RS组在整个研究过程中显示出与STD组相似的体重，HF+FG组仅在第8周显示 punctual 增加的体重（图1A）。因此，与HF组相比，HF+RS组显示体重增加减弱（图1B）。三个HF组的饲料摄入量均低于STD组，而它们的能量摄入在整个实验期间保持较高。在第5周，从代谢笼收集的样本显示，所有组的水摄入量和尿液排泄量相似。然而，HF和HF+FG组收集的粪便量低于STD组。相比之下，HF+RS组显示的值更接近STD组，有趋于显著的趋势（p值=0.061；数据未显示）。

对于器官，三个HF组的PAT重量高于STD组中发现的值（图1C）。然而，与HF组相比，HF+RS和HF+FG组显示PAT重量减少。HF和HF+FG组显示盲肠重量低于STD和HF+RS组（图1D）。HF+RS组显示肝脏重量低于HF组观察到的值，并且与HF+FG组相比 tended to decrease 肝脏重量（p值=0.058；图1E）。

血糖状态

空腹血浆胰岛素（图2B, E）和HOMA-IR（图2C, F）在第6周和第10周时，三个HF组均高于STD组。尽管在研究期间各组空腹血糖（图2A, D）相似，但HF+RS组显示的HbA1c值低于HF组观察到的值，并且HF+FG组在研究结束时显示较低值的趋势（p值=0.054）（图2G）。

餐后血糖（OGTT）在第4周和第8周葡萄糖给药后15至60分钟时，STD组和HF组之间存在差异（图3A, B），表明HF组糖耐量受损。HF+RS组和STD组对应的曲线在第4周和第8周相似。HF组和HF+FG组对应的曲线在第4周相似（图3A），并且在中心点（30和45分钟）高于STD组曲线。在第8周，HF+FG组在葡萄糖负荷后45分钟记录到的葡萄糖值低于HF组对应的值（图3B），与STD组相比，调节了与胰岛素抵抗状态相关的典型平台期。

血浆脂质谱和转氨酶

在第6周，HF和HF+FG组的血浆TAG与STD组相比有所增加（表1），而HF+RS组与HF组相比显示TAG降低。这些差异在研究结束时（第10周）也观察到，但HF+FG组与HF组相比显示TAG降低，尽管仍高于STD组。

在第6周，三个HF组的血浆胆固醇与STD组相比有所降低（表1）。HF+RS组也显示出低于STD组观察到的胆固醇（表1）。尽管在研究结束时（第10周）各组总胆固醇没有差异，但与STD饮食相比，HF饮食影响了LDLc/HDLc和TAGs/HDLc比率的值，这些值通过将RS或FG纳入HF饮食而正常化。

各组间血浆转氨酶或相应比率未发现统计学显著差异（表1）。

粪便微生物群

在门和属水平上，HF和STD饮食喂养的大鼠 within-sample α-多样性指数存在差异。与STD组相比，HF组显示出更高的均匀度和更低的稀有度，尤其是在门水平上（p值≤0.05）。尽管HF+FG组显示出与HF组观察到的相似的α-多样性模式，但HF+RS组逆转了HF饮食促进的均匀度增加和稀有度减少，并显示出更低的丰富度、更低的多样性和更高的优势度，尤其是在属水平上（p值≤0.05）。在门或属水平上，各组之间 between-sample β-多样性没有统计学显著差异。

特别是，与STD组相比，HF组显示出更高的变形菌门（Proteobacteria phylum），同时增加了Blautia、Clostridium XlVa、Desulfovibrio、Escherichia/Shigella和Rothia属，但降低了未分类的Candidatus Saccharibacteria、Clostridium IV、未分类的Muribaculaceae和Prevotella属（p值≤0.05）。与HF组相比，HF+RS组逆转了变形菌门的增加，同时增加了拟杆菌门（Bacteroidetes）和厚壁菌门（Firmicutes）（p值≤0.05）。RS对变形菌门的影响可能是通过减少Desulfovibrio和Escherichia/Shigella属来实现的（p值≤0.05）。此外，HF+RS组阻止了来自拟杆菌门的未分类Muribaculaceae属的减少。然而，HF+RS组减少了Bacteroides和Parabacteroides属（p值≤0.05）。在厚壁菌门，HF+RS组增加了未分类的Clostridiales、未分类的Ruminococcaceae和Turicibacter属，但减少了未分类的Firmicutes和Lactococcus（p值≤0.05）。与HF+RS组不同，HF+FG组显示出与HF组观察到的相似的肠道微生物群组成。

粪便和盲肠样本中的短链脂肪酸

在粪便样本中，第6周时，HF和HF+FG组的总SCFA（表2）低于STD组，而HF+RS组高于HF组。特别是，乙酸和丙酸在HF和HF+FG组中低于HF+RS和STD组。尽管HF和STD组之间异丁酸和异戊酸没有统计学显著差异，但这些值在HF+RS和HF+FG组中特别低于STD组观察到的值。丁酸和戊酸在各组之间未观察到统计学显著差异。在第9周，三个HF饮食组的总SCFA低于STD组。乙酸和丙酸在HF和HF+FG组中低于STD组，而HF+RS组显示这些SCFA减少的减弱。其他SCFA在三个HF组中均低于STD组。在研究结束时，盲肠样本中的总SCFA（表2）在HF+RS组中高于其他组，主要是由于乙酸、丙酸和丁酸的量增加。异丁酸和异戊酸在HF和HF+RS组中低于STD组。此外，HF+RS组显示异戊酸低于HF+FG组。戊酸的值在各组之间相似。

脂肪组织和肝脏的组织学

在PAT中（表3），与STD组相比，HF组表现出更高的总组织学评分，尽管在个体参数（如可变脂肪细胞直径、成脂细胞空泡、肥大细胞、间隔纤维化、血管瘤样血管化和脂肪细胞周围及间隔组织细胞等级）方面没有显示统计学显著差异。相比之下，HF+RS和HF+FG组显示的总组织学评分与STD组相似，表明比HF组观察到的组织学改变更少。

关于肝脏组织学（表4），HF和HF+FG组与STD组相比呈现增加的肝脏脂肪变性，特别是在脂肪变性等级方面。然而，各组之间的总组织学评分没有发现显著差异。值得注意的是，HF+RS组显示出与STD组中发现相似的组织学模式，主要在肝脏脂肪变性的特征方面。此外，所有三个HF组显示门静脉慢性炎症等级低于STD组。

尿液、腹膜巨噬细胞、血液和组织中的氧化应激参数

在第5-6周期间，HF（p值=0.066）和HF+FG（p值<0.05）组显示尿液中的亚硝酸盐低于STD组（表5）。在研究结束时，三个HF组呈现血浆GSH增加 compared to the STD group。HF+RS和HF+FG组血浆GSSG高于STD组，而GSSG/GSH比率没有相关变化。尽管AUC的差异在各组之间未达到统计学显著性，但HF+FG组呈现腹膜巨噬细胞内ROS产生最低，在二氯荧光素 assay 的第120分钟与HF和HF+RS组相比具有统计学显著性（数据未显示）。

在红细胞中，三个HF组显示GR活性低于STD组（表5）。HF+RS（p值=0.072）和HF+FG（p值<0.05）组与HF组相比也显示降低的GR活性。此外，HF+RS（p值=0.064）和HF+FG（p值<0.05）组与STD组相比显示GPx活性增加。总体而言，HF+RS和HF+FG组增加了GPx/GR比率的值。HF+RS和HF+FG组与HF组相比类似地降低了SOD活性，调节了CAT和GPx相对于SOD的比率。HF+FG组显示CAT活性与STD组相比有所增加。

在PAT中（表6），HF和HF+FG组显示TBARS低于STD组，而HF+RS组显示减少的减弱。尽管各组之间SOD活性的差异未达到统计学显著性，但HF+RS和HF+FG组类似地调节了相应的抗氧化酶比率，促进CAT和GPx over SOD，在接受FG后尤其明显，FG促进了更高的CAT活性（CAT/SOD比率，HF+RS与HF组相比p值=0.085，HF+FG与HF组相比p值<0.05）。

在肝脏中（表7），三个HF组显示GPx活性高于STD组观察到的值，影响了相应抗氧化比率（即SOD/GPx、CAT/GPx和GPx/GR）的值。HF+FG组显示GPx活化低于其他两个喂食HF饮食的组，并倾向于使CAT/GPx比率（HF+FG与STD组相比p值=0.084；HF+FG与HF组相比p值=0.073）和GPx/GR比率（HF+FG与STD组相比p值=0.07）正常化，但与STD组相比减少了GSH的量。HF+RS组减弱了HF饮食促进的GPx/GR比率的增加（HF+RS与STD组相比p值=0.058）。

肝脏类二十烷酸

三个HF组显示类二十烷酸的量低于STD组（表8）。HF+RS组表现出中间水平，与HF和HF+FG组相比，20-HETE statistically significantly increased。5-HEPE/5-HETE比率在所有组中保持一致。

讨论

本研究评估了RS（15%）和FG（0.1%）在高脂饮食模型中对糖尿病前期发展的预防效果。如先前所述，10周的HF、低纤维饮食诱导了雄性WKY大鼠的肥胖和糖尿病前期。这种糖尿病前期状态的特征是胰岛素抵抗和代偿性高胰岛素血症，通过增加胰腺β细胞的数量或大小来维持正常