膳食钙摄入与结直肠癌肿瘤微环境中双阴性T细胞浸润密度的关联研究

本刊推荐：本研究通过多中心队列分析揭示膳食钙摄入与结直肠癌肿瘤微环境中CD3+CD4?CD8?双阴性T细胞（DNT）浸润呈正相关（上皮区域OR=1.57，基质区域OR=1.24），为饮食调控肿瘤免疫微环境提供了新视角。采用多光谱免疫荧光（mIF）技术精准量化T细胞亚群，填补了钙信号通路与免疫细胞空间分布关联的研究空白。

　　

研究背景

结直肠癌肿瘤微环境中浸润免疫细胞的类型和数量是影响患者复发和生存的关键决定因素。大量证据表明，较高水平的T细胞浸润与更好的预后相关，尤其是CD3⁺CD8⁺细胞密度。钙离子（Ca²⁺）作为T细胞信号传导的关键介质，参与T细胞活化、细胞因子分泌、迁移分化及凋亡过程。既往研究提示钙补充剂可降低结直肠腺瘤患者炎症标志物水平，并调节结肠黏膜免疫炎症通路基因表达，但膳食钙摄入对肿瘤浸润T细胞亚群的具体影响尚未明确。

研究设计与方法

本研究纳入遗传与结直肠癌流行病学 consortium（GECCO）中943例参与者数据，整合护士健康研究（NHS）、健康专业人士随访研究（HPFS）及安大略家族性结直肠癌登记处（OFCCR）三大队列资源。通过定制9标志物多光谱免疫荧光面板（CD3、CD4、CD8、CD45RA、CD45RO、FOXP3、KRT、MKI67、DAPI）结合机器学习算法，定量分析上皮与基质区域18种非重叠T细胞亚群密度。钙摄入量通过食物频率问卷评估，并区分膳食钙、乳制品钙、非乳制品钙及补充剂钙来源。采用多变量有序逻辑回归模型分析钙摄入与T细胞密度的关联，并针对多重检验进行错误发现率（FDR）校正。

关键发现

较高膳食钙摄入与上皮区域CD3⁺CD4^?CD8^? na?ve双阴性T细胞存在显著正相关（OR=1.57, 95%CI:1.13–2.24），在基质区域同样观察到类似关联（OR=1.24, 95%CI:1.06–1.45）。未发现钙摄入与CD4⁺或CD8⁺T细胞亚群浸润的显著关联。乳制品钙与非乳制品钙来源未呈现显著差异，补充剂钙亦无显著效应。增殖状态（MKI67⁺）分层分析及钙感应受体（CASR）表达分层均未改变主要结论。

机制与意义

双阴性T细胞虽在肿瘤微环境中占比低，但具有强大的细胞因子分泌能力和抗肿瘤活性。钙信号通路可能通过调控T细胞受体（TCR）激活后的钙内流，影响双阴性T细胞的分化和功能。本研究首次通过多标志物共定位技术揭示膳食钙与特定T细胞亚群的空间分布关联，为营养免疫学领域提供重要证据。值得注意的是，双阴性T细胞在结直肠癌预后中的角色存在争议，既往研究提示其高浸润可能与较差生存相关，故钙摄入的免疫调节效应需结合临床结局进一步验证。

局限与展望

研究受限于样本量及肿瘤组织芯片（TMA）而非全切片分析，可能影响罕见细胞亚群的统计效能。未调整磷、镁、维生素D等钙代谢相关营养素的影响，且无法排除癌症发展过程中微环境动态变化的干扰。未来需结合空间转录组学与类器官模型，深入探究钙离子微环境与免疫细胞功能的时空动态交互，并为饮食干预联合免疫治疗提供理论依据。