VEGF与HIF1A基因多态性在印度西北地区不孕症风险中的关联研究：一项病例对照分析

本研究针对印度西北地区不孕症高发问题，通过病例对照设计分析了VEGF和HIF1A基因的六个多态性位点。研究发现VEGF启动子区-2549II、-2578AA和-460CC基因型显著增加不孕风险，尤其在女性群体中关联更强，而HIF1A多态性未显示显著关联。该研究为理解不孕症的遗传机制提供了新证据，对个体化风险评估具有重要临床意义。

　　

不孕症作为影响全球15%育龄夫妇的复杂生殖障碍，其病因涉及遗传、环境和生活方式等多重因素。近年来研究表明，胚胎植入过程中的血管生成异常和缺氧微环境可能是不孕症的重要病理机制。血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子1A(HIF1A)作为调控血管生成和缺氧应答的关键分子，其基因变异可能通过影响基因表达水平而参与不孕症的发生发展。然而，针对印度人群特别是西北地区 Punjab 人群的相关研究尚属空白。

为探究VEGF和HIF1A基因多态性与不孕症的关联性，研究人员开展了一项精心设计的病例对照研究。该研究纳入了193例经临床确诊的不孕症患者和213例性别、年龄匹配的健康对照，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术和直接PCR方法，对VEGF基因的三个启动子区多态性(-2578C/A、-2549I/D、-460T/C)和HIF1A基因的三个外显子多态性(g.C1772T、g.G1790A、g.C111A)进行了基因分型。通过统计学分析评估这些多态性与不孕症风险的关联性。

主要技术方法包括：采用标准酚-氯仿法从外周血样本中提取基因组DNA；使用PCR-RFLP技术对VEGF-2578C/A、-460T/C和HIF1A g.C1772T、g.G1790A、g.C111A多态性进行基因分型；采用直接PCR方法分析VEGF-2549I/D多态性；通过Sanger测序验证分型结果；使用SNPstats软件进行遗传模型分析和统计学检验。

研究结果方面，基因型分布显示所有多态位点在对照组中均符合Hardy-Weinberg平衡定律(p>0.05)。VEGF多态性分析发现，与DD基因型相比，-2549II基因型显著增加不孕风险(OR=2.05, p=0.02)，I等位基因同样与风险升高相关(OR=1.35, p=0.04)。-2578AA基因型携带者的不孕风险显著增高(OR=1.94, p=0.03)，而-460CC基因型也显示风险增加(OR=1.87, p=0.04)。遗传模型分析进一步揭示，-2549I/D多态性在共显性(p=0.02)、隐性(p=0.02)和对数加性模型(p=0.03)下均显著关联风险；-2578C/A和-460T/C多态性分别在共显性和隐性模型中显示显著关联。

分层分析结果表明遗传关联存在性别特异性。在女性亚组中，-2549II基因型和I等位基因、-2578AA基因型和A等位基因、-460CC基因型和C等位基因均显著增加不孕风险，且多种遗传模型均显示显著关联。相反，在男性亚组中未发现显著关联。HIF1A多态性分析显示，g.G1790A和g.C111A位点在所有研究对象中均仅为野生型纯合子，而g.C1772T多态性在病例和对照间无显著差异。

连锁不平衡分析发现VEGF三个启动子多态性之间存在强连锁不平衡：-2549I/D与-2578C/A间(D'=0.99, r²=0.97)、-2549I/D与-460T/C间(D'=0.96, r²=0.93)、-2578C/A与-460T/C间(D'=0.97, r²=0.94)。单倍型分析表明，VEGF-2549I/-2578A/-460C单倍型与总人群(p=0.04)和女性群体(p=0.02)的不孕风险增加显著相关。基因型组合分析显示，同时携带VEGF风险基因型和HIF1A g.C1772T CC基因型的个体具有更高的不孕风险。

研究结论表明，VEGF启动子区-2578C/A、-2549I/D和-460T/C多态性与印度西北地区Punjab人群的不孕风险增加显著相关，这种关联在女性中尤为明显。而HIF1A基因的g.C1772T、g.G1790A和g.C111A多态性在该人群中与不孕症无显著关联。该研究首次报道了VEGF和HIF1A基因多态性在印度西北地区不孕症中的综合作用，为了解不孕症的分子机制提供了重要遗传学证据。研究成果对开发个体化风险评估方法和靶向治疗策略具有重要价值，为未来大型遗传关联研究和功能验证实验奠定了基础。论文发表于《Egyptian Journal of Medical Human Genetics》，为生殖医学领域的遗传学研究提供了新的视角和方向。