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一种简单高效的种子穿刺转化技术:实现珍珠粟和穇子的稳定遗传转化与基因编辑
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年09月12日 来源:AoB PLANTS 2.4
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本研究针对珍珠粟和穇子遗传转化效率低、基因型依赖性强等瓶颈问题,开发了一种基于成熟胚穿刺的农杆菌介导转化新方法。通过优化穿刺感染、真空渗透、激素组合和持续筛选等关键步骤,在珍珠粟基因型ICMB842和ICMB95444及穇子基因型KNE796中分别获得17.74%和18.79%的转化效率,并成功利用CRISPR/Cas9系统对珍珠粟籽粒特异性磷脂酶PgPLD-delta1-7a进行基因编辑。该技术为禾谷类作物的功能基因组研究和精准育种提供了重要技术支撑。
在气候变化和粮食安全挑战日益严峻的背景下,珍珠粟(Pennisetum glaucum)和穇子(Eleusine coracana)作为抗旱、耐瘠薄的特色杂粮作物,其遗传改良备受关注。然而,这两种作物长期面临遗传转化效率低、再生体系不完善等技术瓶颈,严重制约了基因功能研究和分子育种进程。传统的农杆菌介导转化方法需要依赖未成熟胚或长期培养的胚性愈伤组织作为外植体,不仅耗时耗力,而且存在严重的基因型依赖性。尽管此前已有研究尝试通过体细胞胚胎发生途径建立转化体系,但转化效率
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