表达IL-12的工程化溶瘤疱疹病毒通过免疫调控显著抑制肝癌肿瘤发生

本文系统探讨了表达IL-12的工程化溶瘤疱疹病毒（oHSV-IL12）在肝细胞癌（HCC）治疗中的突破性作用。研究通过构建重组HSV-1病毒（oHSV-GMCSF和oHSV-IL12），在H22小鼠模型中证明oHSV-IL12单药治疗可实现肿瘤完全清除，其机制涉及增强淋巴细胞浸润、激活免疫相关基因及通路（如IFN-γ、NK细胞、CD8+ T细胞）。该研究为HCC免疫治疗提供了新型候选策略，凸显了IL-12在溶瘤病毒疗法中的核心价值。

　　

Transgene expressions in vitro of oHSV-GMCSF- and oHSV-IL12-treated Vero and H22 cells

为构建重组溶瘤HSV-1病毒，我们将小鼠GM-CSF或IL-12基因插入HL-1骨架（已删除ICP47）的ICP34.5位点，成功获得oHSV-GMCSF和oHSV-IL12（图1A）。ELISA检测证实，感染Vero细胞后能高效分泌GM-CSF（11.40 ± 0.80 ng/ml）和IL-12（39.47 ± 6.45 ng/ml），而对照组（oHSV-mock或未感染细胞）均未检测到表达（图1B）。值得注意的是，H22细胞中未检测到任何细胞因子（图1B），提示病毒进入或复制受限。

Discussion

利用HSV-1载体进行治疗性基因递送是肿瘤学（尤其是实体瘤）的一种强效策略。既往研究已证明，HSV介导的多种基因（如p53、金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）和干扰素-γ（IFN-γ）基因）在多种小鼠和人类癌症模型中具有疗效。本研究通过工程化改造HSV-1载体表达小鼠GM-CSF和IL-12，评估了它们在肝癌模型中的抗肿瘤效果及免疫激活机制。

Ethics statement

实验动物在层流柜中饲养并维持于无特定病原体（SPF）条件下，环境参数受控（温度24 ± 2°C，湿度50 ± 5%），并采用标准化12小时光暗循环。动物自由获取灭菌饲料和无菌饮水。研究方案经烟台大学伦理委员会批准（批准号20220320-15），并严格遵循美国国立卫生研究院（NIH）关于实验动物护理与使用的指南。

Declaration of competing interest

作者声明不存在任何已知的竞争性经济利益或个人关系，以避免对研究结果产生潜在影响。

Acknowledgments

本研究由山东省“一事一议”顶尖人才计划和山东省自然科学基金（ZR2019PH056）资助。我们感谢Liwen Bianji（Edanz）的Gabrielle White Wolf博士对本文稿英文文本的编辑。同时，我们感谢烟台大学药学院的支持，并致谢北京WellGene公司提供改造病毒。