基于核酸适体的NEK9激酶实时活细胞成像探针开发与应用

来自多机构的研究人员针对传统活细胞成像技术中探针渗透性差、细胞毒性高等瓶颈，开发了一种新型"signal-on"模式核酸适体荧光探针（Apt-011），成功实现NEK9激酶在活细胞内的实时动态可视化。该探针通过靶向诱导构象变化分离荧光-淬灭基团，在保持细胞存活率>95%的同时为激酶相关信号通路研究提供新工具。

　　

通过创新性应用核酸适体（aptamer）技术，研究人员开发出用于实时观测NEK9激酶动态的荧光探针。该团队首先采用体外捕获-SELEX技术筛选出特异性结合NEK9的DNA适体Apt-011，进而利用适体分子量小、低免疫原性和可编程性优势，构建了靶向诱导构象转换的"信号开启"式荧光探针平台。当探针识别细胞内NEK9目标物时，其空间构象变化使荧光基团与淬灭基团分离，从而激活荧光信号。实验证实该探针能在活细胞环境下高效可视化NEK9蛋白（细胞存活率>95%），为研究NEK9相关信号通路提供了突破性工具，同时建立了通过理性适体工程解决活细胞成像关键难题的普适性策略。