精油靶向非包膜ScV-L-A全病毒的多重作用机制研究

本综述系统探讨了植物精油（EOs）及其主要成分对非包膜ScV-L-A全病毒的抗病毒效能，通过气相色谱-质谱（GC-MS）分析精油组成，并采用放射性标记转录本合成与透射电镜（TEM）技术，揭示精油通过抑制RNA聚合酶活性和破坏病毒衣壳结构发挥抗病毒作用，为开发可持续的病毒控制策略提供了新视角。

　　

引言

近年来，随着新发病毒的不断出现，寻找替代性抗病毒药物变得尤为重要。植物源提取物如精油（EOs）因其广谱生物活性、环境友好性和对人体安全性受到广泛关注。精油是植物次生代谢物的疏水性液体浓缩物，提取自植物的花、叶、果实、种子、树皮等部位，通常由亲脂性、低分子量、易挥发的分子组成，主要是萜烯、其氧化衍生物萜类化合物和苯丙素类。精油的组成差异显著，主要取决于植物种类和提取部位，植物生长条件、年龄、栽培品种、提取方法等因素也会影响其含量。通常，不超过2至5种主要成分构成精油的绝大部分，并主要决定其生物学特性，而其他成分含量较少。有时精油的生物活性不能归因于任何主要成分，只有它们的组合才决定精油的生物学特性。由于大多数精油成分具有挥发性，这些物质有潜力以其气态形式应用于病毒灭活，但迄今为止，很少有研究调查其蒸气的抗病毒活性。

大多数关于精油抗病毒作用的研究都是针对有包膜的人类感染病毒进行的，并且认为精油中的化合物主要通过破坏病毒脂质包膜的完整性来发挥其抗病毒影响。缺乏脂质包膜的病毒在表面上持续存在的时间更长，并且比有包膜病毒更具毒力，因此它们对包括精油在内的不同生物活性剂的灭活不太敏感。因此，开发对非包膜病毒有效 yet 对人类安全的制剂需求很高。

在本研究中，我们选择酵母酿酒酵母病毒L-A（ScV-L-A）作为非包膜病毒模型系统，用于评估精油及其主要成分的抗病毒特性。ScV-L-A属于正全病毒科（Orthototiviridae），具有dsRNA基因组，包含两个开放阅读框——第一个编码主要衣壳蛋白Gag，第二个编码RNA依赖性RNA聚合酶，该聚合酶由于翻译过程中罕见发生的-1核糖体移码事件而以Gag-Pol融合蛋白的形式表达。ScV-L-A衣壳直径约为40纳米，具有T=1二十面体对称性，由120个拷贝的衣壳蛋白组成，其中一或两个是Gag-Pol融合变体，以不对称二聚体形式排列。ScV-L-A病毒颗粒（VPs）包装并不紧密，这有助于增强模板的流动性，并在五重对称轴处有18埃直径的开口，据推测这些开口用于核苷三磷酸的进入和病毒转录本的退出。

选择ScV-L-A作为评估精油抗病毒特性的模型系统有几个优点。首先，ScV-L-A核衣壳的结构相当简单，仅由衣壳蛋白、聚合酶和dsRNA基因组组成；因此，与更复杂的病毒相比，确定抗病毒物质的确切靶点预计会更直接。其次，从天然宿主中纯化完整的病毒颗粒，使得可用于深入分析聚合酶活性的基因组合成结构得以制备。第三，ScV-L-A的复制周期缺乏细胞外阶段，因此病毒污染的风险无关紧要；更重要的是，这些病毒对人类不致病，因此对涉及的研究人员的健康不构成威胁。

在本研究中，首次使用非包膜正全病毒科ScV-L-A作为模型系统，研究了所选精油及其主要成分的抗病毒活性。研究了一套广泛的精油，包括柠檬香桃木（Backhousia citriodora F. Muell., Myrtaceae）、柠檬草（Cymbopogon citratus (DC.) Stapf, Poaceae）、 palmarosa（Cymbopogon martini var. motia Bruno, Poaceae）、薰衣草（Lavandula angustifolia Mill., Lamiaceae）、芫荽（Coriandrum sativum L., Apiaceae）、 mandarin（Citrus reticulata Blanco, Rutaceae）、柠檬马鞭草（Aloysia citriodora Ortega ex Pers., Verbenaceae）和茶树（Melaleuca alternifolia Cheel, Myrtaceae）的精油，以及代表精油主要成分的化学合成化合物（柠檬醛、香叶醇、乙酸香叶酯、芳樟醇、乙酸芳樟酯、α-蒎烯、柠檬烯、萜品烯-4-醇和1,8-桉树脑）。通过气相色谱-质谱（GC-MS）测定了测试精油的化学组成，通过靶向病毒RNA聚合酶评估了精油及其主要成分在直接接触（液体）和气相中的抗病毒活性，并通过透射电子显微镜（TEM）观察了对病毒颗粒结构的影响。

材料与方法

酵母菌株与生长培养基

使用携带ScV-L-A-lus（ScV-L-A的一个亚种）的酿酒酵母菌株M437 [L + M-] (wt, HM/Hm [kil-0]) 来纯化病毒颗粒。使用YPD培养基（1%酵母提取物，2%蛋白胨，2%葡萄糖）进行酵母培养。

精油及其主要成分

液体精油制剂购自立陶宛维尔纽斯的JSC “Kvap? namai”公司。使用来自不同国家种植的芳香植物的不同部位制备购买的精油：来自澳大利亚的柠檬香桃木叶和嫩枝，来自印度的柠檬草叶和茎，来自印度的palmarosa全草，来自法国的薰衣草开花部位，来自法国的芫荽种子，来自意大利的mandarin果皮，来自西班牙的柠檬马鞭草叶，以及来自南非的茶树叶。化学合成的主要精油成分购自Carl Roth公司或Sigma-Aldrich公司，其结构式在文中图1中呈现。

精油化学组成的气相色谱-质谱分析

通过GC-MS分析了所有测试精油的化学组成。将每种精油（10 μL）溶解在1 mL戊烷和乙醚（1:1）混合物中，并将1 μL制备的溶液注入GC-MS系统。使用Shimadzu GC/MS-Q2010 PLUS，连接Shimadzu GC-MS-QP2010 ULTRA质谱仪，配备非极性Rxi-5MS毛细管柱进行分析。质谱在电子轰击模式下产生，能量为70 eV，扫描速度为0.97次/秒，质量范围为33-400 m/z。气相色谱仪的炉温设定为50°C（保持1分钟），然后以每分钟5°C的速度升至160°C，保持2分钟，然后以每分钟10°C的速度编程升至250°C，并在最终温度下保持4分钟。使用氦气作为载气，流速为1.0 mL/min。检测器和进样器温度为250°C，离子源温度为220°C。化合物的定性分析和鉴定基于柱保留时间和保留指数与文献数据的比较，以及质谱计算机库（使用Shimadzu的“GC/MS solution” v. 2.71软件以及Wiley和NIST库）。如果质谱库数据与计算机数据的匹配概率等于或高于90%，则确认化合物的鉴定。保留指数是根据一系列正构烷烃（C₇–C₃₀）的保留时间通过线性插值确定的。精油成分的相对百分比是从色谱峰面积计算出来的，没有使用校正因子。使用在线统计平台statskingdom.com进行了主成分分析（PCA）。该方法使用了八种精油的百分比和十三个变量（在至少一个样品中含量≥5%的单个成分）。

病毒颗粒的纯化

酵母细胞在30°C的液体YPD培养基中生长16至24小时。通过5000 × g离心5分钟（4°C）收集沉淀并用蒸馏水洗涤。用于纯化病毒颗粒时，使用约2克细胞。如Dunn和Wobble所述，使用zymolyase消除酵母细胞壁，并将获得的原生质体重悬于含有1%苯甲基磺酰氟（PMSF）的AB缓冲液（20 mM Tris-HCl, pH 7.5, 50 mM KCl, 10 mM MgCl₂）中，并通过与玻璃珠剧烈涡旋来破碎细胞。通过1000 × g离心10分钟（4°C）去除玻璃珠，并通过10000 × g离心10分钟去除粗细胞碎片。收集的上清液中加入0.25体积的25% PEG4000（溶于含2.5 M NaCl的AB缓冲液），冰上孵育30分钟，并在15000 × g离心10分钟（4°C）。用含有5% PEG4000和3 M NaCl的AB缓冲液洗涤沉淀，最后悬浮在220 μL AB缓冲液中。通过CsCl密度梯度（1.36 g/cm³）超速离心127,000 × g 24小时进一步纯化样品。通过SDS-PAGE确认病毒颗粒的存在。使用琼脂糖凝胶电泳检测病毒RNA。选择具有最高病毒颗粒含量的部分，使用Amicon Ultracel YM-100离心过滤装置浓缩至所需体积。使用Zeba? Spin Desalting Columns, 7K MWCO更换缓冲溶液，使用2×病毒颗粒储存溶液（100 mM Tris-HCl, pH 7.6, 300 mM NaCl, 2 mM EDTA）。缓冲液更换后，向病毒颗粒溶液中加入甘油，使其最终浓度达到50%，用于长期储存。

液相抗病毒活性测试

将分离的病毒颗粒悬浮液（5 μL，包含约1 × 10⁹个病毒颗粒，通过电泳分析估算病毒基因组拷贝数确定）与等体积的精油或其主要成分混合，并在室温（22°C）下孵育1、2或24小时。与等体积10%乙醇混合的病毒颗粒用作阴性对照。为检测半数抑制浓度（IC₅₀），将精油及其主要成分用10%乙醇依次稀释一半，将5 μL制备的稀释液与等体积的病毒颗粒混合，并在室温下孵育2小时。为了评估残留的RNA聚合酶活性，对处理过的样品和对照样品进行了体外测定。所有实验均进行三次生物学重复，处理效率表示为平均值±标准差。

气相抗病毒活性测试

将分离的病毒颗粒悬浮液（5 μL，包含约1 × 10⁹个病毒颗粒）用5 μL经DEPC处理的水稀释，并置于试管底部，将25 μL精油或其主要成分置于试管盖内侧。关闭试管，用Parafilm封口，水平放置（避免液体直接接触），并在室温下孵育1、2或24小时。试管盖内侧含有25 μL 10%乙醇的试管用作阴性对照。在处理过的样品和对照样品中评估残留的RNA聚合酶活性。每个实验进行三次生物学重复，处理效率表示为平均值±标准差。

体外测定病毒RNA聚合酶活性

对Ribas和Wickner先前描述的方法进行了微小修改。20 μL反应混合物包含50 mM Tris-HCl (pH 7.6), 10 mM MgCl₂, 20 mM NaCl, 5 mM KCl, 10 mM 2-巯基乙醇, 0.5 mM each of UTP, CTP, ATP and GTP, 10 nM [α-³²P] ATP, 1 U/μL RiboLock RNase Inhibitor, 5% PEG6000, 10 μL来自处理或对照样品的病毒颗粒悬浮液。反应混合物在30°C下孵育180分钟；之后与STOP溶液（85%甲酰胺，0.06%溴酚蓝，25 mM EDTA，1% SDS）以1:1 (v:v)的比例混合，并在含有8 M尿素的7%聚丙烯酰胺凝胶上进行分析，并进行放射自显影。使用ImageJ软件（版本1.53k）分析电泳图像。通过比较对照样品和处理样品之间合成的放射性标记RNA的量来确定精油对RNA聚合酶活性的影响。

透射电子显微镜分析

为了观察用精油或代表精油主要成分的化合物处理后病毒颗粒的结构变化，进行了TEM成像。将3 μL样品滴在碳涂层铜网上，用滤纸吸干，并用3 μL无菌水洗涤10秒。用3 μL 2%乙酸铀酰水溶液对颗粒染色10秒，用滤纸吸干，并额外空气干燥1分钟。使用Morgagni 268 (D)透射电子显微镜对染色的颗粒进行电子显微镜观察。

统计分析

进行回归分析以估计IC₅₀，并根据三个独立实验的结果计算平均IC₅₀值及其标准差。根据Hazra的方法，使用t分布计算IC₅₀值的95%置信区间（CIs）。使用单因素方差分析（ANOVA）和Tukey事后检验评估IC₅₀值之间差异的显著性。当p < 0.05时，认为差异具有统计学意义。所有分析均使用GraphPad Prism 10.5.0进行。

结果

测试精油的化学组成

采用GC-MS分析了精油的组成。表1列出了测试精油的主要成分，补充表S1列出了它们的完整组成。根据其主要成分的化学类别和基于PCA的聚类，本研究中的精油分为四组（图2，表1）。第一组包括柠檬香桃木和柠檬草精油，以柠檬醛含量最高为特征。第二组由palmarosa和薰衣草精油组成，它们分别以醇类香叶醇和芳樟醇及其相应的乙酸酯为主；以及芫荽精油，它以醇类芳樟醇为主。第三组包括mandarin和柠檬马鞭草精油，它们含有高量的烃类柠檬烯。第四组唯一的精油是茶树精油，以醇类萜品烯-4-醇为主要成分。

关于第一组精油，柠檬香桃木精油的主要成分是柠檬醛的两种异构体——香叶醛（48.1%）和橙花醛（42.35%）；次要成分中主要是(E)-异香叶醛（3.04%）、(Z)-异香叶醛（1.62%）和香叶醇（1.47%）。柠檬草精油的特征是香叶醛（39.62%）和橙花醛（33.82%）含量高；观察到香叶醇（8.44%）和乙酸香叶酯（3.63%）含量中等。除了柠檬醛的两种异构体外，这两种油还有12种其他共有成分，包括芳樟醇、香叶醇等。

从第二组来看，palmarosa精油以香叶醇（70.80%）和乙酸香叶酯（17.76%）为主，并且含有少量芳樟醇（2.31%）。薰衣草精油的主要成分包括乙酸芳樟酯（38.16%）和芳樟醇（24.61%），以及中等含量的萜品烯-4-醇（4.22%）。芫荽精油的组成以醇类芳樟醇（67.94%）为主；它还含有大量的单萜烃，α-蒎烯（7.67%）、γ-松油烯（6.82%）和柠檬烯（2.63%），以及乙酸香叶酯（3.89%）。芳樟醇和乙酸香叶酯，以及6种其他成分，被发现是第二组精油所共有的。

属于第三组的mandarin精油以单萜烃柠檬烯（67.06%）和γ-松油烯（19.50%）为主；还检测到中等含量的α-蒎烯（2.87%）。柠檬马鞭草精油中最丰富的成分是柠檬烯（22.96%）和柠檬醛（包括香叶醛（12.56%）和橙花醛（9.80%））；而其他单萜烃和醇类含量较少。确定mandarin和柠檬马鞭草精油之间有26种共有成分，主要的是柠檬烯和α-蒎烯，而其他成分在一种或两种油中仅以痕量存在。

第四组中唯一的茶树精油的主要成分是单萜醇萜品烯-4-醇（40.88%）。它还含有相当数量的烃类γ-松油烯（19.23%）和α-松油烯（9.07%），以及醇类1,8-桉树脑（5.98%）和α-松油醇（3.12%）。

利用ScV-L-A进行精油的抗病毒分析

培养携带ScV-L-A的同基因酿酒酵母菌株，并通过CsCl梯度超速离心纯化病毒颗粒。对所得部分进行SDS-PAGE分析和琼脂糖凝胶电泳分析。将含有最多RNA的部分合并，准备用于抗病毒测试和聚合酶反应，预计这些部分具有包含病毒基因组dsRNA的天然病毒结构。分离的病毒颗粒用于研究精油在液相和气相中的抑制作用。通过测试放射性标记核苷酸的掺入来评估精油和纯成分的抗病毒效果，这直接反映了酵母病毒RNA聚合酶的活性。通过比较对照样品和测试样品之间ScV-L-A ssRNA条带的强度来测量残留的RNA聚合酶活性。精油及其成分可能通过与ScV-L-A病毒颗粒的所有三种结构成分——RNA聚合酶本身、衣壳蛋白和dsRNA基因组——相互作用来影响RNA聚合酶的功能。如图所示，精油及其主要成分可以诱导病毒RNA聚合酶的完全或部分抑制，也可以对RNA聚合酶活性保持中性。

精油及其主要成分在液相和气相对病毒颗粒的影响

将分离的ScV-L-A病毒颗粒在室温下用精油或其一些主要成分在液相和气相中处理1、2或24小时。通过观察放射性标记核苷酸掺入合成的RNA分子中来评估残留的病毒RNA聚合酶活性。

发现在液相中，浓度为50%时，富含柠檬醛的柠檬香桃木和柠檬草精油能够在1小时内分别抑制病毒RNA聚合酶活性100%和90.51%。半数抑制浓度（IC₅₀）分析证实柠檬香桃木精油比柠檬草更有效——暴露2小时后，其IC₅₀值为4.53%（95% CI: 4.05–5.01%），与柠檬草精油的IC₅₀值（15.54%，95% CI: 15.22–15.86%）存在显著差异，且约为其三倍低。纯柠檬醛在最高浓度下仅显示部分失活，1小时为47.85%，接近完全的聚合酶抑制在2小时后实现（94.80%）。在液相中，柠檬醛的IC₅₀在15.40%浓度时达到（95% CI: 14.84–16.24%），与柠檬草相似。在气相中，暴露于柠檬香桃木精油蒸气1小时导致病毒RNA聚合酶活性几乎完全失活（93.78%）。然而，柠檬草精油的效果明显较弱——暴露1小时后RNA聚合酶活性降低22.21%，暴露2小时后降低92.60%。另一方面，柠檬醛蒸气的效果即使经过2小时也可以忽略不计（5.23%），仅在24小时后才记录到完全的RNA聚合酶活性抑制。

在液相中暴露1小时后，第二组精油（palmarosa、薰衣草和芫荽）在50%浓度下引起病毒RNA聚合酶活性的部分抑制，其中薰衣草精油效果最强（77.13%），芫荽精油最弱（19.89%）。另一方面，暴露2小时足以诱导palmarosa精油完全抑制，而薰衣草和芫荽精油引起的抑制仍然是部分的（分别为83.47%和69.13%）。检测到的palmarosa精油的IC₅₀值（28.26%，95% CI: 24.52–32.00%）低于薰衣草（31.31%，95% CI: 23.30–39.32%）和芫荽（46.28%，95% CI: 44.47–48.09%），证实其在第二组精油中具有最强的病毒RNA聚合酶抑制潜力，尽管palmarosa和薰衣草精油的IC₅₀值之间的差异无统计学意义。在气相中，所有三种精油在1小时内引起约10%的微弱RNA聚合酶活性抑制，2小时后，只有palmarosa精油产生明显更强的效果（61.49%）。然而，24小时足以诱导第二组所有精油在液相和气相中完全或接近完全的RNA聚合酶失活。

构成palmarosa精油大部分的香叶醇，在最大浓度下显示出比该精油稍强的效果，在液相中暴露1小时后执行病毒RNA聚合酶活性抑制达80.67%，在液相和气相中暴露2小时后几乎完全抑制（分别为98.74%和96.34%）。这与香叶醇的IC₅₀（34.50%，95% CI 28.27–40.73%）显著大于palmarosa精油的事实有些矛盾。相反，乙酸香叶酯似乎比palmarosa精油弱，在液相中暴露1和2小时仅引起约20%的抑制，并在气相中具有相似的效力。另一方面，构成薰衣草精油约四分之一和芫荽精油约三分之二的芳樟醇，在液相中发挥的效果比精油稍弱，暴露2小时后仅抑制病毒RNA聚合酶活性41.04%，但在气相中显示出与精油相当的效果。乙酸芳樟酯的效力与芳樟醇非常接近，主要区别在于24小时后，它没有完全抑制病毒RNA聚合酶活性，在液相和气相中分别引起86.44%和96.53%的抑制。芫荽精油中第二丰富的成分α-蒎烯在液相中的效果明显低于芫荽精油和芳樟醇，在气相中更是如此，24小时后仅使病毒RNA聚合酶失活54.88%。

第三组精油中的柠檬马鞭草，通过分别在液相和气相中暴露1小时后抑制RNA聚合酶活性91.75%和98.13%而发挥强效作用，导致在两种相中暴露2小时后完全抑制。令人惊讶的是，确定该精油的IC₅₀值相对较高，为41.24%（95% CI: 38.01–44.47%）。另一方面，mandarin精油在液相中的效果非常弱，在50%浓度下，暴露24小时后仅抑制RNA聚合酶活性56.43%。然而，它在气相中显示出更强的效果，分别在暴露1和2小时后引起66.40%和99.37%的抑制。构成mandarin精油大部分的柠檬烯，在液相中显示出与精油相当的效果，并在气相中作用稍弱，暴露2小时后仅使RNA聚合酶失活44.71%。

茶树精油在最大浓度下，在液相中暴露2小时后抑制病毒RNA聚合酶活性98.76%，在相同时间段内在气相中仅抑制23.70%，而24小时足以诱导完全抑制。其主要成分萜品烯-4-醇在液相中暴露1小时后效果更强（96.00%），但在其他方面显示出与精油相似的效力。然而，茶树精油的IC₅₀值（14.39%，95% CI: 13.94–14.95%）是所有测试物质中第二低的，并且比萜品烯-4-醇的IC₅₀（28.68%，95% CI: 25.30–32.06%）低两倍，差异具有统计学意义。茶树精油的次要成分1,8-桉树脑，在液相中暴露2小时后引起病毒RNA聚合酶的明显较弱抑制（45.63%），并且即使在气相中暴露24小时后也未能诱导完全抑制（67.01%）。

精油及其成分对病毒颗粒形态的影响

为了研究暴露于精油及其主要成分对ScV-L-A病毒颗粒形态的影响，采用了TEM。由于高浓度的精油成分会损害TEM成像，因此将病毒颗粒暴露于所选物质的蒸气中。从每组中选择一种代表性精油及其最丰富的成分进行TEM分析。从第一组中，选择了柠檬醛和柠檬香桃木精油，因为该精油对ScV-L-A RNA聚合酶活性的影响比柠檬草精油更强。选择palmarosa精油和香叶醇代表第二组，原因相同。选择mandarin精油和柠檬烯作为第三组的代表，因为柠檬马鞭草精油显示出更接近第一组富含柠檬醛精油的病毒RNA聚合酶抑制模式。茶树精油及其主要成分萜品烯-4-醇是第四组唯一的选择。

基于TEM图像的视觉定性分析，确定柠檬香桃木和palmarosa精油以及它们的主要成分没有引起ScV-L-A病毒颗粒任何明显的形态改变。然而，在受mandarin精油影响的样品中，可以看到变形的病毒颗粒——一些是扁平化和拉长的，另一些更小，有凹痕或其他不规则形状。受柠檬烯影响的样品中充满了比ScV-L-A病毒颗粒更大但核心小得多的球状结构，表明衣壳蛋白发生了强烈的变性。相反，茶树精油和萜品烯-4-醇似乎没有引起如此强烈的改变，但在受这些物质影响的样品中，可以看到比未处理的对照或受第一组或第二组物质影响的样品更多部分衣壳结构解体的病毒颗粒。

讨论

精油及其各自的成分是治疗病毒感染和消毒环境的有前途的天然替代品，既可独立使用，也可与其他抗病毒措施结合使用。虽然精油复杂多变的组成可能对其实际应用构成挑战，但与分离的萜烯相比，它们仍然是更自然的选择。在某些情况下，精油已被证明比其纯成分具有更高的选择性指数（定义为50%细胞毒性浓度与IC₅₀的比率），因此使用更安全。在本研究中，我们测试了8种精油和9种其纯主要成分在液相和气相中对ScV-L-A（一种具有dsRNA基因组的非包膜酵母病毒）作为模型系统的抗病毒活性。

本研究精油的GC-MS分析显示其组成与其他研究人员确定的相似。柠檬醛占我们柠檬香桃木精油的90%以上，占我们柠檬草精油的约70%，反式异构体香叶醛在两种情况下均占主导地位。这些数据与先前公布的结果一致，表明柠檬醛通常占柠檬香桃木精油的约80-90%和柠檬草精油的70-80%，其中香叶醛的丰度超过橙花醛。我们的palmarosa精油中香叶醇与乙酸香叶酯合计占近90%，香叶醇的量是其乙酸酯的数倍，正如其他研究人员所报道的。我们使用的薰衣草精油中近60%由芳樟醇和乙酸芳樟酯组成，后者更丰富。这与报道观察到这些物质在薰衣草精油中的总量在50%至70%之间相似；尽管这两种化合物中哪一种占主导地位往往有所不同。芫荽精油中最丰富的成分是芳樟醇，占精油的近70%，第二丰富的是α-蒎烯——这也与其他研究人员的发现一致。柠檬烯是我们测试的mandarin精油中的主要化合物，占其近70%，与先前描述的柠檬烯约占50-80%的mandarin精油组成相对应。我们的柠檬马鞭草精油也含有相当大量的柠檬烯以及柠檬醛，两者各占油的约20%。Ebadi等人报告了柠檬马鞭草精油中这些成分的相似水平，而其他来源声称柠檬烯含量稍低，柠檬醛含量较高，范围在30%至50%之间。至于茶树精油，它以萜品烯-4-醇为主，约占精油的40%，γ-松油烯约占一半。大多数研究人员报告的成分与我们的相似，萜品烯-4-醇水平达到约40%，并且有类似的次要成分种类。

本研究中测试的某些植物提取物（其精油已被研究）的抗病毒特性已被研究。柠檬草、薰衣草、柠檬马鞭草和茶树精油已显示出对某些有包膜病毒的抗病毒功效，包括单纯疱疹病毒1型（HSV1）、登革热病毒、黄热病病毒、甲型流感病毒（IFVA）、水泡性口炎病毒和