靶向血管内皮细胞的合成脂质纳米颗粒递送TPA mRNA预防静脉血栓形成

《Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery》：Vascular endothelial cell-targeted mRNA delivery via synthetic lipid nanoparticles for venous thrombosis prevention

本综述探讨了利用合成脂质纳米颗粒（LNP）靶向递送组织纤溶酶原激活物（TPA）mRNA至血管内皮细胞，以实现静脉血栓的预防性治疗。研究通过高通量筛选技术成功筛选出具有内皮细胞靶向性的vtLNP载体，并在深静脉血栓（DVT）模型中验证了其显著抗血栓效果及安全性，为mRNA疗法在血栓性疾病中的应用提供了创新性策略。

　　

Highlight

材料

离子化脂质SM-102和Dlin-MC3-DMA、DSPC、胆固醇购自A.V.T制药有限公司（中国上海）。OH-PEG₂₀₀₀-DMG购自金科科技（中国北京）。Luc mRNA、Cy5标记的Luc mRNA、mCherry mRNA和EGFP-mRNA购自科拓生物（中国苏州）。Quant-iT? RiboGreen? RNA检测试剂盒和BCA蛋白检测试剂盒购自赛默飞世尔科技（美国伊利诺伊州）。BV421抗小鼠F4/80抗体等实验材料均来自标准供应商。

筛选靶向血管内皮细胞的LNP

为实现TPA mRNA的血管内皮细胞靶向递送，本研究以环己烷和丙二酸酯为核心骨架，通过酯化、SN2亲核取代和迈克尔加成反应快速合成了一系列结构新颖的离子化脂质（图1a）。所有化合物均经¹H NMR和高分辨质谱（HRMS）表征（附图S1）。采用DNA条形码标记高通量筛选方法，从构建的LNP库中成功筛选出特异性靶向血管内皮细胞的vtLNP。该载体在体内外实验中均表现出优异的内皮细胞靶向性和mRNA递送效率。

讨论与结论

静脉血栓栓塞是肿瘤和糖尿病患者治疗过程中的常见并发症。口服抗凝或抗血小板疗法伴随出血风险升高。FDA批准的TPA蛋白不仅能通过纤维蛋白降解快速溶解已形成血栓，还可增强血液系统的内在纤溶活性。外源性TPA蛋白的治疗潜力因其半衰期短、需频繁高剂量给药及肝快速清除而受限。本研究开发的vtLNP@TPA系统成功实现了血管内皮细胞特异性TPA mRNA递送，在避免肝部表达引发脂代谢紊乱风险的同时，显著抑制了深静脉血栓的发生发展，为mRNA疗法在血栓性疾病防治领域提供了全新解决方案。