基于酪酰胺信号放大技术的超灵敏单细胞荧光成像方法实现广谱沙门氏菌检测

本文开发了一种结合广谱抗沙门氏菌单克隆抗体与酪酰胺信号放大（TSA）技术的荧光成像方法，实现了对13种血清型沙门氏菌的超灵敏（低至100 CFU/mL）、高特异性检测。该方法无需预培养或核酸扩增，4小时内即可完成单细菌细胞水平的可视化检测，在食品安全监测和临床诊断中具有重要应用价值。

High detection sensitivity and accuracy

本研究引入酪酰胺信号放大（TSA）技术，通过实验室自主研发的单克隆抗体显著提升了沙门氏菌荧光成像检测的灵敏度与准确性。该技术通过抗体探针（偶联HRP酶）识别细菌表面蛋白，催化酪酰胺活化并产生级联放大信号。具有多位点抗体结合能力的细菌细胞因此能够沉积数千个Alexa Fluor 647荧光分子，最终在常规荧光显微镜下呈现明亮的单细胞图像。

我们对纯培养样本和人工污染鸡肉冲洗液中的鼠伤寒沙门氏菌（S. typhimurium）进行了检测验证。结果显示，该方法检测限低至100 CFU/mL，且与对照菌株无交叉反应。在鸡肉真实样本中，该方法成功检测到13种常见沙门氏菌血清型，证实其在实际复杂基质中的适用性。与传统方法相比，本技术无需冗长的培养或核酸扩增（如PCR），全程可在4小时内完成，为病原体直接检测提供了高效解决方案。

Conclusion

综上所述，沙门氏菌特异性单克隆抗体与TSA技术的结合，实现了对多种血清型沙门氏菌的超灵敏检测。该方法的两个核心优势在于：单克隆抗体广谱识别多种沙门氏菌血清型，TSA技术大幅增强荧光信号并加速检测进程。因此，本方法兼具高灵敏度与高特异性，可广泛应用于引起食物中毒的多种沙门氏菌株检测，为食品安全、临床诊断及环境监测提供了强有力的技术支撑。