摘要: 本研究旨在从虻虫中筛选并鉴定具有潜在生物活性的肽类分子, 解析其结构特征与功能属性, 为新型天然肽类药物的研发提供理论基础。首先使用磷酸缓冲盐溶液 (phosphate buffered saline, PBS) 提取虻虫中生物活性肽, 采用冷乙醇沉淀蛋白质并进行固相萃取纯化 (solid-phase extraction, SPE)。经LC-MS/MS获得原始质谱数据后, 利用PEAKS Studio软件进行肽段识别和序列分析。随后使用Peptide Ranker预测肽段活性潜力, 进一步结合多种生物信息学工具, 对肽段功能特性进行分析, 包括活性位点、水溶性、稳定性、毒性及肠道吸收能力等指标。最终, 结合肽段结构信息开展分子对接分析。本研究共鉴定出10 378条虻虫肽段, 长度集中于6～26个氨基酸, 大部分肽段相对分子质量在1 500 Da以下, 低于2 500 Da的肽段占97.49%。通过Peptide Ranker筛选出95条评分 ≥ 0.80的候选活性肽段, 进一步借助BIOPEP-UWM确定了59条具有神经调节作用关键残基的肽段。生物信息学预测显示, 这59条肽段中29条水溶性良好、22条稳定性较高、43条具备较好的肠道吸收潜力, 且均无毒, 为后续功能验证及活性肽开发提供了理论依据。在此基础上, Peptide Ranker评分最高的多肽FPPRDF与二肽基肽酶III (dipeptidyl peptidase III, DPP III) 进行分子对接时稳定结合, 提示其可能具有神经调节与抗肿瘤作用。本研究构建了一套系统、高效的活性肽筛选与功能预测流程, 能够从天然资源中快速识别具有药用潜力的生物活性肽。该策略为后续的功能验证、作用机制解析及新型肽类药物开发提供了技术支撑。
