组氨酸标签（His-tag）对葡萄球菌激酶（SAK）变体活性与稳定性的影响评估及其治疗应用前景

本综述系统探讨了N端组氨酸标签（His-tag）对四种葡萄球菌激酶（SAK）变体（包括野生型与非免疫原性3A变体）的稳定性与功能活性的影响。研究发现His-tag虽对热稳定性影响较小，但显著降低其在酸性条件下的稳定性，并改变其去折叠路径。研究强调在蛋白质工程与治疗开发中需谨慎评估亲和标签的潜在影响，并推荐SAK STAR作为最具潜力的候选分子。

　　

Highlight

我们的系统分析表明，N端组氨酸标签（His-tag）的存在：（i）显著降低了蛋白质的pH稳定性，这一现象通过色氨酸荧光和远紫外椭圆率检测到的转变得以证实；（ii）在三种SAK变体（除SAK 42D 3A外）中轻微降低了SAK介导的纤溶酶原转化为纤溶酶的效率；（iii）对所研究蛋白质的热稳定性没有明显影响。值得注意的是，His-tag的存在改变了SAK变体的去折叠机制，表明在去折叠过程中存在中间体构象。在测试的蛋白质中，SAK STAR表现出最佳的结构和功能鲁棒性，而SAK 42D 3A则是最不稳定且最容易发生聚集的变体。这些结果强调了在蛋白质工程和治疗开发中评估亲和标签的生物物理效应的必要性，并指出SAK STAR是进一步治疗开发中最合适的候选分子。

Conclusions

我们对四种带His-tag和天然形式的SAK变体进行的系统分析表明，N端His-tag的存在：（i）显著降低了蛋白质的pH稳定性，如通过色氨酸荧光和远紫外椭圆率检测到的转变所证明；（ii）在三种SAK变体（SAK 42D 3A除外）中轻微降低了SAK介导的纤溶酶原转化为纤溶酶的效率；（iii）对所研究蛋白质的热稳定性没有明显影响。值得注意的是，His-tag的存在改变了SAK变体的去折叠机制，表明在去折叠过程中存在中间体构象。在测试的蛋白质中，SAK STAR表现出最佳的结构和功能鲁棒性，而SAK 42D 3A则是最不稳定且最容易发生聚集的变体。这些结果强调了评估亲和标签的生物物理效应的必要性，并指出SAK STAR是进一步治疗开发中最合适的候选分子。