NovaplexTM Dermatophyte qPCR检测法在皮肤指甲样本中诊断皮肤癣菌与白色念珠菌感染的临床性能评估

本研究通过头对头对比评估NovaplexTM Dermatophyte RUO qPCR与EurobioPlex Dermatophytes CE-IVD qPCR检测法，证实NovaplexTM在皮肤和指甲样本中检测皮肤癣菌和白色念珠菌（C. albicans）具有高度一致性（总体符合率94.1%），展现出优于传统镜检（DME）和培养法的敏感性，为皮肤真菌病（dermatomycoses）的分子诊断提供可靠新工具。

　　

Highlight

INTRODUCTION

皮肤真菌感染（dermatomycoses）是最常见的人类真菌病[1]。这类感染影响皮肤、指甲和毛发，多数由皮肤癣菌（dermatophytes）引起，包括毛癣菌属（Trichophyton spp.）和小孢子菌属（Microsporum spp.）等嗜角蛋白的丝状真菌。不过，酵母菌（尤其是白色念珠菌 Candida albicans）和其他非皮肤癣菌霉菌（例如镰刀菌 Fusarium spp.、曲霉 Aspergillus spp.、链格孢 Alternaria spp.）也可能导致部分病例[[2], [3], [4], [5]]。

Sample selection and laboratory procedures

2024年2月至7月期间，我们在西班牙潘普洛纳的纳瓦拉大学医院共收集了945名患者的998份样本，用于皮肤癣菌的分子检测研究。其中735份（74%）为指甲样本（包括131份手指甲和600份脚趾甲），263份（26%）为皮肤标本。大部分皮肤样本以皮屑形式送检，但其中46份采样自含Amies凝胶培养基的拭子。

DNA提取严格遵循Seegene操作说明。简要来说，取少量临床样本采用自动提取系统进行核酸纯化，洗脱体积为100μL。随后使用Novaplex^TM Dermatophyte RUO试剂盒（Seegene）和EurobioPlex Dermatophytes CE-IVD标记试剂盒（Eurobio Scientific）进行实时荧光定量PCR（qPCR）检测。两种方法均采用多路复用PCR技术，可同步检测多种目标真菌。

Head-to-head comparison between qPCR assays

Novaplex^TM Dermatophyte与EurobioPlex Dermatophytes两种qPCR检测方法的整体比较结果如表1所示。若排除小孢子菌属（Microsporum spp.）靶标，两种方法的总体符合率（OPA）为94.1%（939/998，95%置信区间：92.4%–95.5%）。各靶标（不包括白色念珠菌和小孢子菌属）的一致性结果详见表2。

按样本类型（皮肤与指甲）分层的分析结果见表S1A、S1B和表S2A、S2B（补充材料）。

DISCUSSION

Novaplex^TM Dermatophyte检测法在皮肤和指甲样本中对皮肤癣菌和白色念珠菌（C. albicans）的分子检测表现优异，与EurobioPlex Dermatophytes CE-IVD标记试剂盒相比总体符合率达到94.1%。若忽略小孢子菌属相关案例，仅发现59/998（5.9%）不一致结果，其中大多数（62.7%）经Novaplex^TM Dermatophyte检测确认为真阳性，而假阴性结果仅占10.2%。