系统性AL型肝淀粉样变性综合诊断策略：基于质谱蛋白分型的病理学创新与验证

本综述系统阐述了系统性淀粉样变性（AL型）的肝脏病理诊断策略，创新性整合刚果红染色（Congo red staining）、激光显微切割联合质谱分析（LMD/MS）、免疫组化（IHC）及透射电镜（TEM）等技术，并引入失效模式与效应分析（FMEA）进行质量控制。研究证实LMD/MS在淀粉样蛋白分型中具有更高特异性，为小样本活检提供精准诊断方案，显著提升早期诊断准确性。

　　

引言

系统性淀粉样轻链（AL）淀粉样变性是一种罕见疾病，涉及可溶性前体蛋白错误折叠、寡聚体形成及淀粉样纤维沉积，其特征为β-折叠结构、细胞外基质沉积和肝脏血管壁形成。本病起病隐匿，临床表现多样，易导致误诊和早期诊断困难，因此需通过组织活检进行准确诊断和前体蛋白分型。常规病理诊断采用福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）肝活检组织切片。

材料与方法

本研究对象为一名70余岁男性患者，因乏力、尿黄4个月入院。实验室检查显示转氨酶升高（ALT 58 IU/L，AST 81 IU/L）、碱性磷酸酶升高（282 IU/L）、总胆红素升高（98 μM）及白蛋白降低（28.4 g/L）。影像学检查发现肝脏弥漫性增强及右叶大面积低密度影。肝活检组织经FFPE处理后，进行苏木精-伊红（H&E）染色、刚果红染色、LMD/MS、IHC、免疫荧光和TEM检测，并采用FMEA方法进行风险评估和质量控制。

结果

淀粉样变性诊断与前体蛋白分型

H&E染色显示肝细胞外间隙和Disse腔内有嗜酸性无定形物质沉积。刚果红染色呈砖红色，偏振光下呈现特征性苹果绿双折射。LMD/MS分析鉴定免疫球蛋白κ轻链（IGK）为主要前体蛋白（检索号P0DOX7、Q6PJF2、A2NYV3）。

诊断验证

TEM观察到无序排列的纤维丝状结构（直径8-14 nm）。IHC显示κ轻链阳性（蛋白酶K修复法）、λ轻链阴性。免疫电镜显示κ轻链胶体金颗粒附着于淀粉样纤维，λ轻链无附着。免疫荧光进一步证实κ轻链沉积。

讨论

淀粉样变性涉及前体蛋白异常折叠形成β-折叠结构。AL型是最常见类型，占70%，预后差（中位生存期1-2年）。刚果红染色结合偏振光是诊断金标准，但需注意假阴性（推荐切片厚度8-10 μm）。LMD/MS较IHC、免疫荧光或电镜具有更高分型特异性，尤其适用于小样本。FMEA优化了组织利用效率（6连片设计减少损耗）。本研究整合传统与新技术，建立了可推广至肾、肺等多器官的诊断路径。

结论

淀粉样纤维分型对治疗选择至关重要。分子基因检测和质谱技术的应用推动了分型进展，但组织学评估仍是肝淀粉样变性诊断的金标准。需系统分析相关技术以提高诊断可靠性。