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基于前向散射干涉的折射率检测与毛细管电泳-激光诱导荧光联用技术的创新集成
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年09月16日 来源:ELECTROPHORESIS 2.5
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来自国际团队的研究人员成功开发了一种低成本通用折射率(RI)检测方法,可与现有毛细管电泳(CE)荧光检测平台兼容。该研究巧妙利用同一激光源实现前向散射干涉(FSI)检测,仅需增加双元光电二极管即可同步获取高特异性荧光信号和通用RI信号。突破性实现了电渗流(EOF)实时监测,为快速分离分析提供了新范式。
这项突破性研究将前向散射干涉技术(Forward-Scatter Interferometry, FSI)巧妙整合到毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)系统中。科研人员脑洞大开地利用原有荧光检测的激光光源,通过简单加装双元光电二极管(bicell photodiode),就实现了通用折射率检测与高特异性荧光检测的完美联用。
在实验中,聚焦激光在检测区域形成独特的干涉条纹图案。当样品通过时,其折射率变化会引起条纹位移,被灵敏的双元光电二极管捕获。这种设计妙处在于:两种检测信号源自同一激光源和检测区域,使得电泳图谱具有完美的时空一致性。更令人惊喜的是,FSI信号能直接捕捉每个分离过程中的样品塞,无需中性标记物即可精准追踪电渗流(EOF)动态。
研究还展示了利用热标记物通过FSI信号持续监测EOF的创新方法。有趣的是,FSI信号同时响应折射率和分离电压的变化——这与反向散射干涉(BSI)的特性相似。在高分离电压条件下,这种特性反而带来信噪比的提升,既能缩短分析时间又可改善峰效率,可谓一箭双雕。
这项技术革新为生命科学检测提供了新思路:通过"一光两用"的巧妙设计,在保持LIF高灵敏度优势的同时,增加了通用型RI检测维度。这种集成方案不仅成本低廉,更为重要的是为复杂生物样品的多参数同步检测开辟了新途径,在蛋白质组学、代谢物分析等领域具有广阔应用前景。
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