运动诱导肌节损伤在R349P结蛋白敲入小鼠中的定量研究：肌原纤维肌病研究新方法

这篇研究通过免疫荧光和开源软件QuPath定量分析了R349P结蛋白敲入小鼠（DES）模型在运动后肌节损伤（sarcomeric lesions）的变化，揭示了xirp 1/2和filamin-C（FLNC）作为肌原纤维损伤标志物的价值，为肌原纤维肌病（MFM）的病理机制和运动干预影响提供了新见解。

　　

引言

肌原纤维肌病（MFM）是一组以肌原纤维退化和结蛋白（desmin）阳性蛋白聚集为特征的遗传异质性疾病。研究聚焦于R349P结蛋白敲入小鼠（模拟人类R350P desminopathy），通过标记filamin-C和xin蛋白（xirp 1/2）探索肌节损伤的定量方法及运动对其影响。

材料与方法

小鼠模型：使用R349P和R405W结蛋白敲入、结蛋白敲除及W2711X filamin-C敲入小鼠，通过免疫荧光和电子显微镜观察肌节病变。

运动干预：野生型与突变小鼠进行高强度跑步机运动，1小时后取比目鱼肌分析。

图像分析：利用开源软件QuPath建立半自动流程，定量xirp 1/2阳性肌节损伤的密度、大小和宏病变（>10 μm²）。

结果

肌节损伤的普遍性：所有模型均出现filamin-C和xirp 1/2阳性损伤，且与结蛋白聚集无重叠（图1）。

基因型差异：非运动状态下，杂合和纯合R349P小鼠的损伤密度显著高于野生型（3473 vs. 1874 lesions/mm²；纯合达16924 lesions/mm²）。

运动影响：运动后野生型和杂合小鼠损伤密度显著增加（5232和5468 lesions/mm²），而纯合小鼠因基础损伤已极高未进一步恶化（图5）。

讨论

标志物价值：xirp 1/2和filamin-C可灵敏标记肌节损伤，为光镜水平定量提供可靠工具。

病理机制：R349P突变导致肌原纤维稳定性下降，运动加剧损伤，提示机械应力在desminopathy中的促进作用。

临床意义：研究支持高强度运动可能加重人类desminopathy患者的肌纤维损伤，需谨慎制定康复策略。

结论

通过QuPath定量分析，证实R349P小鼠肌节损伤的基因依赖性及运动敏感性，为MFM的病理研究和临床管理提供了新方法学依据。