INPP4B通过调控纤连蛋白外泌驱动胰腺癌迁移侵袭的分子机制

胰腺导管腺癌(PDAC)的侵袭转移机制亟待阐明。多伦多大学团队发现脂质磷酸酶INPP4B通过激活TRPML1依赖性溶酶体外泌途径，促进纤连蛋白1(FN1)分泌，进而激活F-肌动蛋白组装和黏着斑激酶(FAK)磷酸化，最终增强PDAC细胞迁移侵袭能力。该研究揭示INPP4B-TRPML1-FN1轴是PDAC恶性进展的关键驱动因素，为靶向干预提供新策略。

　　

胰腺导管腺癌(PDAC)作为最具侵袭性的恶性肿瘤之一，其五年生存率不足10%。肿瘤细胞的迁移和侵袭能力是导致PDAC高死亡率的关键因素，但调控这些恶性表型的分子机制尚未完全阐明。近年来，溶酶体作为细胞内的"信号枢纽"备受关注，不仅参与降解功能，还在膜修复、营养感知和肿瘤转移中发挥重要作用。其中，肌醇多磷酸4-磷酸酶II型(INPP4B)作为一种脂质磷酸酶，在PDAC中异常高表达并与不良预后相关，但其通过何种机制促进肿瘤进展仍存在知识空白。

多伦多大学Golam T. Saffi等人在《Journal of Biological Chemistry》发表的研究，系统揭示了INPP4B通过调控溶酶体定位和外泌功能促进PDAC转移的新机制。研究人员采用基因过表达和敲除技术构建PDAC细胞模型，结合免疫荧光、ELISA和蛋白质印迹等技术分析FN1分泌水平，通过Transwell实验评估细胞迁移侵袭能力，并利用TCGA数据库进行临床相关性分析。

FN1是INPP4B介导F-肌动蛋白形成的关键因子

研究发现INPP4B过表达显著增加细胞边缘F-肌动蛋白(F-actin)的组装，而敲除INPP4B则降低F-actin强度。这种效应可被外源性FN1处理所逆转，证明INPP4B对细胞骨架的重塑依赖于FN1。免疫荧光显示，INPP4B过表达细胞中磷酸化FAK^Tyr397水平升高，敲除后降低，且FN1处理可恢复FAK活性，证实INPP4B-FN1-FAK信号轴的存在。

INPP4B调控溶酶体定位的FN1空间分布

通过共聚焦显微镜观察发现，FN1主要定位于溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)阳性的溶酶体腔内。PIKfyve抑制剂apilimod引起溶酶体肿胀后，70%的LAMP1⁺溶酶体内出现FN1积聚。INPP4B过表达促使FN1和LAMP1向细胞外周转移，而敲除则导致其向核周区聚集，线性回归分析显示二者定位高度一致。

TRPML1介导的溶酶体外泌是FN1分泌的关键途径

TRPML1特异性抑制剂ML-SI3可阻断INPP4B诱导的溶酶体和FN1外周定位。ELISA检测显示INPP4B过表达使细胞外FN1水平升高3倍，敲除后降低，且ML-SI3处理能抑制这种效应。蛋白质印迹证实分泌的FN1为全长形式，排除了培养基中牛源FN1的干扰。

FN1是INPP4B促迁移侵袭效应的必需介质

伤口愈合和Transwell实验表明，INPP4B敲除细胞的迁移侵袭能力下降50%，外源FN1可完全恢复。更关键的是，用抗FN1抗体免疫去除条件培养基中的FN1后，INPP4B过表达细胞的促迁移效应被显著抑制，直接证明FN1的功能必要性。

临床数据与分子机制的双重验证

TCGA分析显示PDAC患者中INPP4B与FN1表达呈正相关，且高FN1水平预示不良预后。此外，INPP4B还独立调控β1-整合素(ITGB1)和E-钙黏蛋白(CDH1)的表达，可能通过多途径协同促进转移。

该研究首次阐明INPP4B通过重塑溶酶体磷酯酰肌醇(PtdIns)组成，激活TRPML1通道引起钙离子释放，进而促进溶酶体携带的FN1外泌，最终通过FN1-整合素-FAK信号轴驱动PDAC转移的完整机制。这不仅为理解PDAC侵袭性提供了新的理论框架，更提示INPP4B-TRPML1-FN1通路可作为PDAC治疗的潜在靶点，特别是针对TRPML1的小分子抑制剂或FN1中和抗体可能具有转化医学价值。研究采用的溶酶体定位分析、条件培养基功能验证等创新方法，也为肿瘤微环境研究提供了技术范式。