酶解辅助的亲水相互作用色谱-质谱联用技术解析浒苔中磺酸化多糖ulvan的结构特征

本研究采用PL25 ulvan裂解酶选择性降解浒苔多糖，结合亲水相互作用色谱-质谱联用技术（HILIC-MS/MS）和核磁共振（NMR），系统解析了ulvan寡糖的序列结构与硫酸化模式，为阐明其构效关系奠定基础。

　　

Highlight

本研究通过PL25家族ulvan裂解酶降解浒苔多糖，结合HILIC-MS/MS和NMR技术，首次实现ulvan寡糖的精准测序与硫酸化定位分析。

Materials and chemicals

实验材料购自威海世纪生物海藻有限公司，ulvan裂解酶由中国海洋大学海洋微生物工程实验室惠赠。采用HiTrap QFF柱、Bio-Gel P₂/P₄凝胶等完成样品纯化。

Quantitative and qualitative analysis of UO by HILIC-ESI-MS

通过HILIC-ESI-MS获得总离子流图（TIC）和提取离子流图（EIC），在m/z 95.9511处检测到特征性硫酸根碎片离子（[SO₄]^•?），证实寡糖的硫酸化修饰。

Conclusion

创新性建立"酶解-HILIC-MS/MS-NMR"联用策略，发现ulvan主链由β-D-GlcA-(1→4)-α-L-Rha3S和β-D-Xyl-(1→4)-α-L-Rha3S以4.6:1比例构成，其中15%木糖残基含硫酸化修饰。