优化儿童矮小症诊断：整合临床与靶向NGS策略提升病因检出率

为解决儿童矮小症(SS)病因诊断难题，意大利研究团队对102例病因不明患儿（含GHD-SS与ISS亚型）开展靶向NGS panel测序研究。结果显示总体诊断率达14.9%，在GHD-SS和ISS组分别为14.3%和15.6%，证实一线NGS策略在精准筛选队列中具有竞争优势，为表型评估和个体化治疗提供遗传学依据。

　　

矮小症(Short Stature, SS)是儿科内分泌门诊最常见的就诊原因之一，其病因复杂且具有高度异质性。线性生长作为多因素调控过程，遗传变异是身高差异的主要决定因素。传统上，生长障碍多被归因于生长激素(GH)-胰岛素样生长因子1(IGF-1)轴功能障碍，但随着研究深入，人们认识到SS病因涉及生长板软骨细胞增殖分化的多种生物学通路紊乱，包括外在调节因子（如营养、激素、炎症细胞因子）和内在机制（如细胞外基质异常、细胞内及旁分泌信号通路异常）。尽管全基因组关联研究已证实身高是多基因性状，但单基因遗传病仍在部分患者中起关键作用。由于临床表现多样且缺乏特异性，仅依靠临床指标常导致误诊，因此分子遗传学技术在SS诊断和精准管理中的重要性日益凸显。

在此背景下，意大利帕多瓦大学医院儿科内分泌单元的Laura Guazzarotti等研究人员在《Endocrine Connections》发表研究，旨在通过整合临床评估与靶向下一代测序(NGS)技术，优化病因不明矮小症儿童的诊断流程。研究团队采用回顾性研究设计，对2018-2022年间就诊的102例病因不明SS患儿（包括57例特发性GH缺乏症(GHD-SS)和45例特发性矮小症(ISS)）进行定制化靶向基因panel测序，重点分析82个与SS相关的基因。通过美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)标准进行变异解读，并结合父母样本进行分离分析验证。

研究主要采用以下关键技术方法：1）临床表型精准评估：包括身高、坐高、身高速度、骨龄等人体测量学参数，严格排除继发性GHD、小于胎龄儿(SGA)及已知遗传病患者；2）定制化NGS基因panel检测：覆盖生长板功能调控相关基因（含外在调节因子如GH/IGF-1轴基因和内在调节因子如旁分泌信号、细胞外基质组织相关基因）；3）变异分类体系：依据ACMG指南将变异分为致病性(P)、可能致病性(LP)、意义不明确(VUS)和"热点VUS"（高证据等级但未达致病标准）；4）统计学分析：采用非参数检验和分类变量比较分析组间差异。

研究结果

队列特征

102例患者中GHD-SS组57例（孤立性GHD 42例，联合垂体激素缺乏(CPHD)15例），ISS组45例（家族性SS 21例，散发性SS 23例）。两组身高SDS无显著差异（-2.67 vs -2.52），但ISS组躯干/下肢比例失调发生率显著更高（26.7% vs 10.5%）。CPHD患者中80%存在脑部结构异常，显著高于孤立性GHD组（16.7%）。

NGS诊断效能

总体诊断率为14.9%（15/101），GHD-SS和ISS组分别为14.3%和15.6%。在GHD-SS组中，致病变异不仅见于GH合成分泌相关基因（GH1、GHRHR），还发现于细胞内信号传导基因（CREBBP、GNAS）；ISS组诊断率在家族性和散发性病例中分别为23.8%和8.7%，检出基因包括NPR2、COL2A1、DVL1、PTPN11等综合征相关基因。

基因型-表型关联

携带致病变异的患者与未确诊者在身高SDS、身高速度SDS、骨龄延迟等参数上无显著差异，表明传统临床指标难以预测遗传诊断结果。在ISS患者中，约60%的致病变异来自患病父母，体现了遗传模式的多样性。

讨论与结论

本研究证实，在严格筛选的病因不明SS患儿中，一线靶向NGS策略可达到14.9%的诊断率，与既往研究相当但更具临床可行性。研究发现值得关注的三方面意义：

首先，GHD-SS患者中发现的CREBBP和GNAS变异揭示了GH-IGF1轴之外的新型致病机制，提示生长板内在缺陷可能与GH分泌异常共存并协同导致表型。

其次，ISS组中检出PTPN11（Noonan综合征）、DVL1（Robinow综合征）等基因变异，但患者缺乏典型综合征特征，凸显了这些基因变异的表型谱系比传统认知更宽泛，需通过基因检测实现早期识别。

最后，研究中VUS检出率高达57.4%，但数量与SS严重程度无相关性，强调需通过家系分离分析和功能实验明确其临床意义。

该研究的优势在于采用统一NGS平台平行分析GHD与ISS群体，并整合CNV检测与ACMG标准变异解读。局限性包括样本量较小可能影响亚组分析效能，以及定制panel可能遗漏未知基因变异。未来可通过全外显子测序(WES)和多组学整合进一步提升诊断率。

本研究实践表明，将靶向NGS作为一线诊断工具可用于临床常规工作，尤其有利于发现非典型表现的遗传性SS病例。遗传诊断不仅为病因不明的矮小症儿童提供精准诊疗依据，对预测临床进展、指导治疗策略（如GH治疗反应评估）及遗传咨询均有重要价值，最终推动儿科内分泌领域向精准医学模式转型。