综述：释放订书肽的抗病毒潜力：抗击人类嗜神经病毒感染的新前沿

这篇综述系统探讨了订书肽（stapled peptides）技术如何通过稳定α-螺旋结构增强抗病毒肽（AVPs）的稳定性、生物利用度和细胞渗透性，从而有效靶向HSV、HIV、SARS-CoV-2等嗜神经病毒的进入和融合机制。文章详细介绍了烃类（hydrocarbon）、内酰胺（lactam）、二硫键（disulfide）等多种肽订书策略，及其在抑制病毒生命周期关键环节（如病毒附着、膜融合和复制）中的应用前景，为开发新型抗神经病毒疗法提供了重要方向。

　　

概述

嗜神经病毒如单纯疱疹病毒（HSV）、人类免疫缺陷病毒（HIV）、严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）等能够侵入中枢神经系统，引发严重神经系统疾病甚至死亡。当前抗病毒策略如小分子药物和单克隆抗体存在耐药性、窄谱活性及副作用等局限，而抗病毒肽（AVPs）虽具有高特异性和低毒性，却面临稳定性差、生物利用度低和细胞穿透不足的挑战。肽订书技术通过共价交联稳定肽的α-螺旋构象，显著提升其蛋白酶抗性、细胞渗透性和靶标结合亲和力，为抗病毒治疗开辟了新途径。

订书肽概述

订书肽技术由Verdine团队首创，通过在肽序列中引入非天然氨基酸（如烯烃类氨基酸），利用环闭合复分解反应（RCM）在i, i+4或i, i+7位置形成烃类“订书钉”，锁定α-螺旋结构。这种修饰不仅增强肽的螺旋度（可达90%），还大幅提升其抗酶解能力和细胞膜穿透性。除烃类订书外，内酰胺桥（如Lys-Asp交联）、二硫键桥接（Cys-Cys）及点击化学驱动的三唑环连接等方法也广泛应用，各具特色：内酰胺订书合成简便、稳定性高；二硫键可逆且适用于细胞内递送；三唑订书则具有优异的生物相容性和特异性。

单双订书肽对比

单订书肽（如i, i+4交联）主要稳定α-螺旋，改善蛋白酶抗性和细胞渗透性；而双订书肽（如i, i+4和i+7, i+11双交联）能同时稳定α-螺旋和β-折叠结构，显著增强结合亲和力、口服生物利用度和细胞内靶向能力。但双订书肽设计更复杂，需计算模拟避免干扰关键结合界面。研究表明，双订书肽在靶向“不可成药”蛋白相互作用（PPI）方面更具优势。

订书策略多样性

除经典α-螺旋订书外，β-折叠/β-发夹订书（如4-巯基脯氨酸交联）、交叉缝合订书（多交联约束）及环/转角订书（如半胱氨酸烷基化）等技术拓展了肽结构的稳定范围。这些策略通过增强刚性、抗降解能力和功能多样性，使订书肽能精准模拟天然蛋白识别模体，适用于更广泛的治疗场景。

抗神经病毒应用

HIV治疗

订书肽如NYAD-1（靶向HIV-1衣壳蛋白）和SAH-MPER（模拟gp41膜近端外部区）通过抑制衣壳组装或病毒融合，展现低微摩尔级抗病毒活性。双订书肽RQ-01靶向SARS-CoV-2和HIV的六螺旋束（6-HB）融合机制，经鼻给药在仓鼠模型中显着降低病毒载量，兼具预防和治疗潜力。

HSV抑制

基于HSV-1聚合酶C末段的烃类订书肽，通过抑制DNA合成过程因子，有效阻断病毒复制。优化后的肽（N端疏水Val替换）在人类原代角膜上皮细胞中选择性抑制HSV-1，为眼部疱疹性角膜炎的局部治疗提供候选。

SARS-CoV-2防控

订书脂肽RQ-01靶向保守的6-HB融合机制，对多种SARS-CoV-2变体具纳摩尔级抑制活性，且溶解度与合成效率俱佳。内酰胺订书肽功能化生物传感器实现40 TCID₅₀/mL的检测灵敏度，为快速诊断提供新工具。

RSV融合阻断

双订书肽4（靶向RSV F蛋白HR2域）破坏六螺旋束形成，经鼻给药抑制小鼠呼吸道合胞病毒感染。化学订书约束无序C端肽成螺旋构象，降低结合熵罚，增强与核蛋白（N-protein）互作亲和力。

埃博拉病毒干预

胆固醇偶联订书肽EBOV-7（靶向GP2 HR2域）通过抑制膜融合，在小鼠模型中成功抵御致死性埃博拉感染，展示跨物种抗丝状病毒潜力。

挑战与展望

订书肽的临床转化仍面临合成成本高、规模化生产难、潜在免疫原性及口服生物利用度低等挑战。未来需优化订书策略降低成本、开发口服递送系统，并探索与现有抗病毒药或先进递送技术联用。此外，加强体内药代动力学、毒理学及长期安全性评估至关重要。订书肽技术不仅有望革新抗病毒治疗，更为癌症、自身免疫病等领域提供新思路。

结论

肽订书技术通过强化抗病毒肽的稳定性、效力和递送效率，为对抗神经病毒提供了强大工具。尽管设计合成仍具挑战，但其在靶向病毒进入、融合及复制关键环节的卓越性能，预示着下一代抗病毒疗法的广阔前景。持续创新与优化将推动订书肽从实验室迈向临床，应对新兴病毒威胁。