HSYA靶向ZBP1–166R位点抑制MAVS信号通路：脑缺血再灌注损伤的潜在治疗新策略

本研究揭示羟基红花黄色素A（HSYA）通过特异性靶向Z-DNA结合蛋白1（ZBP1）的A166R位点，抑制线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）介导的神经炎症通路，显著改善大脑中动脉闭塞/再灌注（MCAO/R）模型大鼠的神经功能缺损和线粒体功能障碍，为缺血性脑卒中治疗提供了新型ZBP1拮抗剂设计模板。

　　

研究亮点

ZBP1是MCAO/R损伤中的关键靶点，其表达水平在模型大鼠脑组织中显著上调

激光散斑血流成像仪清晰显示大鼠脑血流变化：当缝线插入大脑中动脉时，脑血流降至基线水平的55%；再灌注24小时后，脑血流进一步降至基线的60%（图1A、B）。Longa评分证实模型成功建立。Western blot结果显示，MCAO/R组大鼠脑组织中ZBP1蛋白表达显著升高（图1C），而HSYA治疗组呈现剂量依赖性下调。免疫荧光染色显示ZBP1主要分布于神经元胞质，且MCAO/R组荧光强度显著增强（图1D）。

HSYA通过靶向ZBP1–166R位点抑制MAVS信号通路激活

蛋白质分子对接模拟表明HSYA与ZBP1蛋白的A166R位点存在稳定结合（结合能：-7.8 kcal/mol）。Co-IP实验证实ZBP1与MAVS在MCAO/R大鼠脑组织中存在直接相互作用。HSYA治疗显著抑制ZBP1-MAVS复合物形成，并下调下游TBK1磷酸化水平。在OGD/R诱导的HT22细胞模型中，HSYA处理使细胞凋亡率降低42.3%（p<0.01），同时ATP产量提升1.8倍。

HSYA改善线粒体功能并抑制神经炎症反应

ELISA检测显示HSYA组炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β释放量较模型组下降57.6%-68.4%。线粒体膜电位检测提示HSYA使JC-1聚合体/单体比值恢复正常水平（p<0.001）。Western blot分析证实HSYA通过调控ZBP1-MAVS-TBK1信号轴，抑制NF-κB核转位和IRF3磷酸化，从而阻断炎症级联反应。

讨论

缺血性脑卒中临床治疗主要依赖静脉溶栓再灌注，但再灌注损伤限制其疗效时间窗。本研究首次证实HSYA通过精准靶向ZBP1–166R位点，破坏ZBP1-MAVS相互作用，进而抑制线粒体源性炎症通路。该机制为开发新型ZBP1拮抗剂治疗ZBP1相关疾病提供了分子模板。

结论

MCAO/R损伤激活ZBP1-MAVS通路诱导神经炎症，而HSYA通过直接靶向ZBP1-A166R位点逆转该过程。本研究不仅阐明HSYA抗MCAO/R作用涉及ZBP1-A166R位点，更为治疗ZBP1相关疾病提供了创新策略。