Ravulizumab在NMOSD真实世界临床应用中的疗效与机制探究：从药物代谢到细胞周期调控的深入分析

本综述系统探讨了Ravulizumab在视神经脊髓炎谱系疾病（NMOSD）真实世界应用中的疗效机制，重点解析了药物代谢产物（如AITC-GSH、NAC-AITC）通过调控细胞周期G2/M期阻滞和活性氧（ROS）通路诱导肝癌细胞凋亡的作用路径，为靶向治疗提供新视角。

　　

Highlight

化学试剂

异硫氰酸烯丙酯（AITC）、谷胱甘肽（GSH）、L-半胱氨酸（Cys）、N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）、二甲基亚砜（DMSO）和无脂肪酸牛血清白蛋白购自日本Nacalai Tesque公司。葡萄糖浓度为1000 mg/l的D-MEM培养基购自和光纯药工业（东京，日本）。三氟乙酸（TFA）、碘化丙啶（PI）、核糖核酸酶A（RNase A）和二亚苯基碘鎓氯化物（DPI）购自美国Sigma-Aldrich公司。对羟基苯甲酸乙酯购自东京化学工业（东京，日本）。

AITC及其代谢产物对细胞增殖的影响

通过流式细胞术研究AITC及其代谢产物对HepG2细胞增殖的影响。与DMSO处理的对照组相比，AITC、AITC-GSH和NAC-AITC在12小时引起G₂/M期细胞周期阻滞（图2A）。虽然AITC-Cys-Gly也引起G₂/M期阻滞，但其效力低于AITC、AITC-GSH和NAC-AITC。此外，AITC-Cys诱导的细胞周期阻滞可忽略不计（图2A）。AITC、AITC-GSH和NAC-AITC在12小时处理后引起G₂/M期阻滞，并在24小时增强凋亡性细胞死亡。

讨论

AITC通过诱导凋亡对多种癌细胞（包括肝细胞癌）发挥体外抗癌作用[16]。膳食AITC被代谢为四种代谢产物：AITC-GSH、AITC-Cys-Gly、AITC-Cys和NAC-AITC[37]。需要更详细地了解AITC代谢物对癌细胞的影响，以阐明膳食AITC抗癌作用的机制。先前研究表明，AITC和BITC的GSH或Cys结合物对膀胱癌细胞具有细胞毒性[18]。本研究首次证明AITC代谢物AITC-GSH和NAC-AITC通过诱导G₂/M期阻滞对HepG2细胞发挥细胞毒性作用。此外，研究还发现AITC-GSH和NAC-AITC在HepG2细胞中转化为AITC-GSH，导致细胞内ROS水平升高。ROS水平升高与G₂/M期阻滞相关，而DPI（一种ROS抑制剂）处理取消了这种阻滞。这些结果表明，AITC代谢物通过增加细胞内ROS水平诱导G₂/M期阻滞。

结论

膳食AITC在吸收后在体内迅速代谢。本研究表明，不仅AITC，其代谢物AITC-GSH和NAC-AITC也通过增加细胞内ROS水平和ERK磷酸化对肝细胞癌HepG2细胞产生细胞毒性作用。此外，即使用NAC-AITC处理HepG2细胞，NAC-AITC也会代谢为AITC-GSH。这些结果表明，AITC的细胞内GSH结合降低了游离还原型GSH水平，导致ROS水平升高，从而诱导细胞周期阻滞和凋亡。