基于质量源于设计（QbD）的AXS-05抗抑郁复方药物稳定性指示色谱分析方法开发与验证

本研究针对抗抑郁复方药物AXS-05（右美沙芬/安非他酮组合）在临床试验阶段缺乏QbD指导的分析方法问题，开发了基于质量源于设计理念的RP-HPLC分析方法。通过三因子实验设计优化色谱条件，成功建立了灵敏度高、选择性好的稳定性指示方法，其线性、精密度、准确度等参数均符合ICH指南要求，为新型抗抑郁复方药物的质量控制提供了科学可靠的分析手段。

　　

在抗抑郁药物研发领域，AXS-05（右美沙芬/安非他酮复方）作为处于临床试验阶段的新型组合疗法，其质量控制方法的建立面临重大挑战。传统分析方法开发存在参数可变性高、可靠性不足等问题，而国际人用药品注册技术协调会（ICH）现行验证指南对方法变异性的控制要求尚不完善。特别是对于右美沙芬（Dextromethorphan, DEXTRO）和安非他酮（Bupropion, BUPRO）这种新型组合，尚未建立基于质量源于设计（Quality by Design, QbD）理念的分析方法，难以满足现代药品研发对方法稳健性的高标准要求。

为此，研究人员在《Future Journal of Pharmaceutical Sciences》发表了创新性研究方法，采用QbD策略开发了灵敏度高、选择性好的稳定性指示色谱方法。该研究通过系统性风险评估和实验设计，成功建立了适用于AXS-05合成混合物的反相高效液相色谱（RP-HPLC）分析方法，为临床试验阶段的药物质量控制提供了可靠技术支撑。

研究团队采用多项关键技术方法：首先运用分数阶乘设计（Fractional factorial design）对色谱条件进行系统优化，选取有机相比例、流动相pH值和流速作为关键方法参数（CMPs）；其次通过三维响应面分析研究各参数对保留时间、分辨率和峰拖尾因子等关键方法属性（CMAs）的交互影响；最后采用强制降解实验考察药物在酸、碱、氧化和热应力条件下的稳定性特征。所有实验均使用合成混合物样本，采用Agilent Infinity 1200 HPLC系统配合Phenomenex ODS C₁₈色谱柱进行分析。

效果独立变量对响应值的影响

通过27组实验运行的响应数据分析发现，有机相比例（A）、pH值（B）和流速（C）均为显著模型项。右美沙芬保留时间方程为Rt_DEXTRO = +4.31+0.030A-0.078B+0.026C，安非他酮保留时间方程为Rt_BUPRO = +9.93+0.028A-0.087B+0.029C。模型充分精度值均大于4，调整R2与预测R2差值小于0.2，表明模型具有良好预测能力。

设计空间

基于响应面方法学，最终确定最优色谱条件为：甲醇与磷酸钾缓冲液比例50:50（v/v），pH 3.7，流速0.8 mL/min。在此条件下，右美沙芬和安非他酮的保留时间分别为4.398 min和9.991 min，分辨率达到6.986，峰拖尾因子分别为0.987和1.105，理论塔板数分别为5795和9843，所有系统适用性参数均符合要求。

强制降解研究

强制降解实验显示：在碱性水解条件下降解最显著，右美沙芬和安非他酮降解率分别达18.96%和19.54%；酸性水解条件下（0.5N HCl，70℃回流30 min）降解率分别为18.75%和16.99%；氧化应激条件下（3% H₂O₂，室温1 h）降解率分别为15.48%和16.22%；热应力条件下降解最小（70℃ 3 h降解率分别为13.56%和12.22%。所有降解实验均出现降解峰，表明方法能有效分离降解产物。

方法验证

该方法在右美沙芬2.25-11.25μg/mL和安非他酮5.25-26.25μg/mL浓度范围内呈现良好线性，相关系数（R2）分别为0.9992和0.9989。重复性、日内精密度和日间精密度试验的相对标准偏差（RSD）均小于2%。右美沙芬和安非他酮的检测限（LOD）分别为0.068μg/mL和0.169μg/mL，定量限（LOQ）分别为0.206μg/mL和0.512μg/mL。加样回收率在98-102%范围内，符合ICH接受标准。

研究结论表明，基于QbD理念开发的RP-HPLC方法成功实现了右美沙芬和安非他酮复方药物的同时测定。该方法通过系统的实验设计和优化，建立了稳健的色谱条件，各项验证参数均符合ICH Q2(R2)指南要求。强制降解研究证明该方法能有效分离药物降解产物，具备良好的稳定性指示能力。特别值得强调的是，QbD方法开发策略本身已包含稳健性验证，无需额外进行 robustness 考察。该研究为临床试验阶段的新型复方药物质量控制提供了范例，填补了QbD方法在该药物组合分析领域的空白，对推进抗抑郁新药研发具有重要实践意义。