雌二醇与孕酮通过非caspase-3依赖途径拮抗缺氧诱导的皮层神经元凋亡机制研究

本研究针对缺氧所致神经元损伤问题，由研究人员通过建立缺氧/复氧（H/R）模型，探讨17β-雌二醇（E2）、孕酮（P4）及其联合方案（EP）对小鼠原代皮层神经元的保护机制。研究发现激素处理显著提升细胞活性并降低神经元死亡，但未显著影响caspase-3表达，为激素疗法的非凋亡途径神经保护作用提供了新证据。

　　

研究表明缺氧会导致神经元损伤，而17β-雌二醇（17β-estradiol, E₂）和孕酮（progesterone, P₄）在此类条件下展现出神经保护特性。为探究其具体机制，研究团队通过缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation, H/R）技术构建脑缺氧损伤模型，对取自15天胎龄小鼠胚胎的原代皮层神经元进行7天体外培养。神经元经E₂、P₄及其联合制剂（EP）预处理后接受缺氧刺激，并通过微管相关蛋白2（MAP2）进行神经元鉴定，SMI-311与SMI-312抗体标记神经突和胞体。

细胞活性与损伤分别采用MTS法和乳酸脱氢酶（LDH）法检测，凋亡情况通过碘化丙啶（PI）/Hoechst染色评估，Western blotting技术分析切割型caspase-3（cleaved caspase-3）表达水平。结果证实培养细胞主要为具有成熟神经突的神经元。缺氧显著降低细胞活性并加剧神经元死亡，同时伴随caspase-3表达上调；而激素处理能有效提升细胞存活率并减轻神经元损伤。值得注意的是，虽然激素疗法缓解了缺氧损伤，但各组间caspase-3表达未见显著差异，表明其神经保护机制可能不依赖于caspase凋亡通路。该研究为激素疗法在缺氧性神经损伤中的临床应用提供了新的理论依据。