基于LC-MS/MS与高分辨质谱联用技术的西格列汀/二甲双胍复方片中基因毒性亚硝胺杂质同步检测方法开发及电离模式比较研究

本研究针对西格列汀/二甲双胍复方片中NDMA与NTTP两类基因毒性亚硝胺杂质难以同步检测的难题，开发了基于LC-APCI-MS的分析方法。研究表明APCI电离模式显著优于电喷雾电离，且高分辨Q-TOF与三重四极杆质谱均满足验证要求（R2>0.997，回收率95-102%），为糖尿病药物质量控制提供了关键技术支撑。

　　

基因毒性亚硝胺杂质近年来已成为西格列汀(sitagliptin)/二甲双胍(metformin)复方片剂的重要安全性隐患，其中既包括已知的N-亚硝基二甲胺(NDMA)，又涉及新发现的与活性成分相关的7-N-亚硝基-3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(NTTP)，即N-亚硝基西格列汀(N-nitroso-STG-19)。目前尚无能够同步定量这两类杂质的分析方法。

研究人员成功开发并验证了一种基于液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)结合大气压化学电离(APCI)的稳健分析方法。通过对比电离模式与质量分析器发现，LC-APCI-MS对NDMA的检测性能显著优于电喷雾电离(ESI)，而两种电离模式均适用于NTTP分析。高分辨四极杆飞行时间质谱(Q-TOF)与三重四极杆质谱平台均符合法规验证要求，在线性度(R²>0.997)、回收率(95-102%)和精密度(RSD<5.7%)等指标上表现优异。

值得注意的是，虽然气相色谱-质谱(GC-MS)是检测NDMA等亚硝胺的主要手段，但由于NTTP存在挥发性不足和色谱分离度差的问题，该方法并不适用于NTTP的定量分析。作为治疗2型糖尿病的一线药物，本研究开发的检测方案为西格列汀/二甲双胍复方制剂的质量控制与安全供应提供了重要技术保障。