利用ddPCR技术揭示多发性骨髓瘤BM-FFPE样本中BRAFV600E与NRASQ61R突变的临床意义与预后价值

本研究首次采用微滴式数字PCR（DD-PCR）技术对印度多发性骨髓瘤（MM）患者骨髓石蜡包埋（BM-FFPE）组织进行检测，成功量化BRAFV600E和NRASQ61R突变。研究发现突变检出率＞80%，其中BRAFV600E负荷与疾病分期（β=?36.95, p=0.0041）和骨溶解病变显著相关，NRASQ61R在进展期疾病中富集（p=0.02）。高突变负荷与2年无进展生存期（PFS）缩短相关，证明DD-PCR在BM-FFPE样本中具有重要临床应用潜力。

　　

多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma, MM）表现出显著的遗传异质性，其中MAPK（Mitogen-Activated Protein Kinase）通路突变日益被认为是疾病进展和治疗耐药性的驱动因素。本研究首次采用微滴式数字PCR（Droplet Digital PCR, DD-PCR）技术，对骨髓福尔马林固定石蜡包埋（Bone Marrow Formalin-Fixed Paraffin-Embedded, BM-FFPE）组织进行检测，以定量MM中的BRAF^V600E和NRAS^Q61R突变。这也是首次在印度MM人群中开展此类研究。

突变检出率超过80%。BRAF^V600E表现出疾病分期特异性变化：在中度MM中最低，在晚期疾病中显著升高（MMII与MMIII相比，p=0.0453）。治疗后突变负荷下降（p=0.038），并与临床分期（β=?36.95, p=0.0041）和溶骨性病变（β=?25.97, p=0.0268）呈负相关。NRAS^Q61R在进展期疾病中富集（p=0.02），并随疾病进展呈上升趋势（β=14.38, p=0.0686）。较高的BRAF和NRAS突变负荷与较低的2年无进展生存期（Progression-Free Survival, PFS）相关。

本研究证实，对BM-FFPE样本应用DD-PCR技术既可行又具有丰富的信息价值。但研究也存在固有局限性：DD-PCR测量可能受到采样偏差、微滴变异和FFPE DNA质量的影响。单中心设计和小样本量限制了结果的普适性，但也表明DD-PCR在测序和临床分层方面具有辅助应用的潜力，值得在更大群体中进行验证。