利用重组原核凝集素亲和层析技术降低单克隆抗体中高甘露糖糖型的创新策略及其在生物制药中的应用价值

本文推荐一种基于重组原核凝集素（RPL-Man2）的亲和层析技术，可特异性去除单抗（mAb）中的高甘露糖（HM）糖型。该方法能显著降低HM水平（如Man5-Man9），且不影响其他糖型谱，为生物制药过程中关键质量属性（CQA）的控制提供了高效解决方案。

　　

^1. 高甘露糖糖型结构的单抗生产

通过基因工程CHO细胞系（EG2-hFc和RTX）在1升批次培养中生产两种单抗池。细胞密度在12天内从3×10⁵个细胞/mL增长至1.5-2.0×10⁶个细胞/mL，培养结束时从收获液中纯化分泌型单抗。

讨论

目前尚无单一方法能完全解决生物过程中糖基化异质性或HM糖变异性问题。我们提出的修饰方法是一种相对简单的选择技术，与化学酶法糖工程（chemoenzymatic glycoengineering）相比成本更低，适用于消除或减少特定糖型（如HM结构）的含量。该技术有助于从异质混合物中分离重组蛋白，可得到单一糖型或选定糖型组合。

作者贡献声明

Neha Tushar Dalvi： 评审与编辑、方法学、研究实施。Michael Butler： 评审与编辑、初稿撰写、验证、监督、方法学、研究实施、资金获取、概念化。Elizabeth Matthews： 评审与编辑、方法学、研究实施、概念化。

利益冲突声明

本文作者声明无与稿件内容相关的利益冲突。

致谢

本研究使用的凝集素由GlycoSelect Ltd（爱尔兰都柏林）友情提供。感谢Robert Dunne和Akram Shehni在整个项目中的有益讨论和评论。资金由企业爱尔兰（Enterprise Ireland）与GlycoSelect合作的创新合作项目基金IP/2022/1011提供。