胆管癌小鼠模型的深度表征与比较分析：揭示肿瘤异质性及微环境特征

本研究针对胆管癌(CCA)小鼠模型缺乏系统表征的问题，通过对11种基因工程小鼠模型进行组织病理学与免疫组化分析，揭示了不同模型在肿瘤亚型、生长模式及微环境特征的显著差异。研究发现9种模型可有效模拟人类CCA特征，为靶向治疗研究提供了关键实验依据。

　　

胆管癌(Cholangiocarcinoma, CCA)作为一种起源于胆管上皮的高度恶性肿瘤，因其诊断晚、治疗选择有限而备受关注。近年来，尽管基因研究为理解CCA的复杂性提供了新视角，但如何找到能真实模拟人类疾病特征的实验模型仍是重大挑战。现有的各种小鼠模型在多大程度上能再现人类CCA的病理特征？这个问题直接关系到临床前研究的可靠性和转化价值。

为此，来自德国慕尼黑工业大学病理研究所的Margaret Tulessin等研究人员在《Laboratory Investigation》发表了系统性研究，对11种不同基因背景的小鼠模型进行了深度表征和比较分析。他们采用组织学染色(H&E、Sirius red)和16种标志物的免疫组化技术，从肿瘤细胞特征到肿瘤微环境(TME)进行了全面评估。

研究团队主要运用了以下关键技术：对80个小鼠FFPE样本进行组织病理学评估（采用WHO标准和共识声明标准）；对代表性病变进行16种标志物的免疫组化分析（包括CK7、CK19、MUC2等上皮标志物及CD3、CD45R等免疫标志物）；使用半定量评分系统进行统计学分析；同时对比分析了24例人类CCA样本和67例临床遗传学数据。

研究结果从多个维度揭示了不同模型的特性：

A. 肿瘤性病变方面：

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  在11个模型中9个成功诱导出CCA，共发现1665个CCA结节

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  AKT/N1ICD和AKT/N3ICD模型可模拟大胆管型CCA，而AKT/N2ICD等模型则呈现小胆管型特征

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  肿瘤生长模式存在明显差异：AKT/N1ICD和AKT/N3ICD出现导管内生长，而AKT/Hes5则表现为导管周围生长

B. 肿瘤细胞特征分析显示：

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  腺体形成程度在AKT/N1ICD等模型中最高，分化程度较好

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  KRAS/TP53模型表现出最高的核多形性程度

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  坏死现象主要在AKT/N1ICD和AKT/FBXW7模型中观察到

C. 肿瘤微环境特征：

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  间质反应在所有模型中普遍较低

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  炎症程度总体较低，但KRAS/TP53模型相对较高

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  多核巨细胞在所有模型中均较少见

免疫组化分析进一步揭示了分子表达的差异性：CK7在AKT/N1ICD等五个模型中表达最高，而MUC2在AKT/N3ICD和AKT/Hes5模型中表达显著。值得注意的是，FGFR2表达在小鼠模型中的平均水平(H-score=50)显著低于人类CCA样本(H-score=121)。

研究还发现，仅AKT/N3ICD和AKT/N1ICD模型出现了癌前病变（胆管上皮内瘤变，BillN），这使它们成为研究早期CCA发生的理想模型。此外，研究记录了超过1500个细胞改变灶(FCA)和少量肝细胞癌(HCC)及混合型肝癌(cHCC-CCA)。

人类CCA样本的分析显示：67%为小胆管型，25%为大胆管型，83%表现为肿块形成型生长模式。遗传学分析发现93%的人类iCCA存在体细胞突变，包括KRAS(7例)、TP53(13例)、FGFR2(4例)等关键基因变异。

讨论部分强调，NOTCH信号通路相关模型（AKT/N1ICD和AKT/N3ICD）能模拟人类大胆管型CCA的特征，并出现癌前病变，这与NOTCH通路在胆管分化中的作用相符。研究同时指出，模型中的炎症程度普遍低于人类CCA，这可能限制了其在模拟炎症驱动型癌变方面的应用价值。

该研究的重要意义在于首次系统性地比较了多种CCA小鼠模型的病理特征，为后续研究提供了模型选择的依据。研究人员强调，不同模型在肿瘤亚型、生长模式、分子表达和微环境特征方面存在显著差异，因此需要根据具体研究目标（如靶向治疗、免疫治疗或早期癌变机制）谨慎选择最适合的模型。这项工作为胆管癌的转化研究建立了重要的实验基础，将推动更精准的临床前研究设计。