综述：癌症治疗中的基因编辑：克服耐药性与增强精准医学

本综述系统阐述了CRISPR基因编辑技术在癌症治疗中的突破性应用，重点分析了其在克服耐药性、增强化疗敏感性及优化免疫疗法（如CAR-T细胞）方面的机制，同时探讨了溶瘤病毒递送系统等前沿策略，为精准医学提供了革命性工具。

　　

Abstract

CRISPR系统彻底改变了癌症基因治疗领域，通过精准的遗传操作为靶向癌基因破坏、突变校正和免疫系统调节提供了前所未有的工具。这一突破性技术在克服耐药性、增强化疗敏感性以及改善免疫治疗策略（例如CRISPR工程化的CAR-T细胞）方面展现出显著潜力。此外，溶瘤病毒介导的CRISPR递送已成为实现肿瘤特异性基因编辑的新方法，最大程度减少了脱靶效应。基于CRISPR的癌症治疗药物从临床前研究到临床试验的快速转化，凸显了其巨大的治疗价值。

技术机制与应用前沿

CRISPR技术通过向导RNA（gRNA）引导Cas9核酸酶至特定基因组位点，实现DNA的双链断裂。在癌症治疗中，此技术主要用于三大方向：致癌基因（如KRAS、MYC）的定向敲除、致癌突变（如TP53点突变）的精准校正，以及免疫细胞的功能强化。例如，通过敲除T细胞中的PD-1基因，可显著增强其抗肿瘤活性；而碱基编辑技术（Base Editing）则无需造成DNA双链断裂即可实现C•G to T•A或A•T to G•C等单碱基转换，为纠正致癌突变提供了更高安全性的方案。

克服耐药性与协同治疗

化疗耐药是癌症治疗失败的主因之一。CRISPR技术可通过靶向调控药物代谢酶（如CYP450家族）、药物外排泵（如P-糖蛋白/P-gp）或DNA修复通路（如BRCA1/2）相关基因，逆转肿瘤细胞的耐药性。研究证实，联合使用CRISPR介导的基因沉默与传统化疗药物（如顺铂或紫杉醇），可显著提高肿瘤细胞对药物的敏感性。此外，在免疫治疗领域，CRISPR工程化的CAR-T细胞不仅可增强对实体瘤的浸润能力，还能通过敲除免疫检查点分子（如CTLA-4、TIM-3）解除肿瘤微环境的免疫抑制。

靶向递送与精准编辑

递送效率与特异性是CRISPR临床转化的关键挑战。病毒载体（如腺相关病毒/AAV）虽效率较高，但存在免疫原性和插入突变风险。近年来，非病毒载体（如脂质纳米颗粒/LNP）和生物材料介导的递送系统发展迅速。特别值得注意的是，溶瘤病毒（如HSV-1或腺病毒）被设计为携带CRISPR组分，可在肿瘤细胞内选择性复制并释放编辑工具，实现局部基因编辑的同时减少对正常组织的脱靶效应。

临床转化与挑战

目前多项CRISPR癌症疗法已进入临床试验阶段，涵盖血液肿瘤（如白血病、淋巴瘤）和实体瘤（如肺癌、胶质母细胞瘤）。然而，该技术仍面临脱靶效应、体内编辑效率不足、免疫原性（如抗Cas9抗体产生）以及递送载体靶向性等多重挑战。未来研究需聚焦于高保真Cas变体（如HiFi Cas9）、抗抗体工程化改造以及多组学指导的个性化编辑策略，以推动其向临床精准医学的全面应用。