基于pCuGA-AFcI协同免疫网络探针的五氯酚现场检测技术突破：绿色定向固定策略与信号放大机制

本研究创新性地提出基于pCuGA-AFcI的协同免疫网络探针技术，通过抗Fc免疫球蛋白（AFcI）与抗体的特异性桥接作用，实现抗体定向固定（Orientation-specific immobilization）并显著提升免疫层析检测（ICA）性能。该策略使五氯酚（PCP）检测灵敏度提升3.2倍（IC10达0.019 ng/mL），为环境污染物现场检测提供了绿色高效的解决方案。

　　

亮点解读（Highlights）

基于"免疫网络"的探针合成策略启发了我们提出新型免疫桥接机制：利用抗Fc免疫球蛋白（AFcI）与抗体的特异性相互作用，显著增强亲和力并促进免疫网络构建，从而提升抗体结合的稳定性。

制备方法（Preparation of the pCuGA）

将100 mg聚乙烯吡咯烷酮（PVP）加入含20 mL去离子水的玻璃烧杯，随后加入34 mg CuCl₂·2H₂O并进行超声分散。待溶液完全均质后，加入20 mg没食子酸（GA）继续反应30分钟。最后用0.1 mol/L NaOH调节溶液pH值直至颜色由浅蓝变为棕色，室温条件下持续反应即得pCuGA材料。

pCuGA-ICA技术原理（Relevant interpretation on the pCuGA-ICA）

基于pCuGA的竞争性免疫层析检测（pCuGA-ICA）原理如方案1所示。本研究优先考虑低毒性、简约性、环境友好性和全生命周期 simplicity 的设计理念。通过将天然GA、PVP和Cu²⁺自组装成金属多酚网络（MPN），成功构建了具有优异光学特性、良好生物相容性和特异性识别能力的pCuGA信号示踪剂（方案1A）。该结构通过Cu²⁺配位与GA粘附特性的协同作用，为抗体定向固定提供了理想平台。

结论（Conclusion）

综上所述，pCuGA-AFcIAb-ICA技术具有四大突出优势：（1）符合生物安全与绿色化学理念的合成技术；（2）实现抗体定向控制并保持抗体活性；（3）耦合效率、结合常数k_a和解离常数K_D计算表明pCuGA-AFcI具备成为免疫分析标签的潜力；（4）该方案具有普适性，可通过简单搅拌完成抗体标记，无需复杂化学修饰。