中药单体组合TSZAF通过抑制Wnt/β-catenin信号通路及中性粒细胞趋化以阻遏肺癌转移

本研究聚焦肺癌转移防治难题，揭示中药复方调神治癌方（TSZAF）活性单体组合（TSZAF mc）通过抑制Wnt/β-catenin信号通路与CXCL5表达，减少中性粒细胞浸润，从而显著抑制循环肿瘤细胞增殖、迁移及转移灶形成，为中药抗肿瘤转移提供新机制与治疗策略。

　　

肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因，而转移过程是导致治疗失败和患者死亡的核心环节。在肿瘤转移的复杂过程中，循环肿瘤细胞（CTCs）扮演着关键角色，它们像“种子”一样从原发肿瘤脱落，进入血液循环，最终在远隔器官形成新的转移灶。因此，如何有效干预CTC的活性，阻止其定植和生长，已成为肿瘤研究领域的重大挑战。传统化疗药物虽有一定效果，但毒副作用大且易产生耐药性，而中医药在肿瘤治疗中具有多成分、多靶点、整体调节的特点，在防治肿瘤转移方面展现出独特优势。

在此背景下，研究人员聚焦于临床用于肺癌治疗的中药复方调神治癌方（Tiao-Shen-Zhi-Ai Formular, TSZAF）。为了更精确地探究其药效物质基础及作用机制，他们创新性地将其三种主要活性成分组合，开发出一种全新的TSZAF单体组合（TSZAF mc），并深入研究了其在抑制肺癌生长和转移方面的效果及其内在分子机制。该研究成果已发表在《Chinese Journal of Natural Medicines》上。

为开展本研究，研究人员运用了多项关键技术：包括使用人源循环肿瘤细胞系CTC-TJH-01和小鼠Lewis肺癌（LLC）细胞系进行体外细胞功能实验（细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭检测）；构建LLC小鼠移植瘤模型以进行体内药效学评价；采用蛋白质免疫印迹（Western Blot）技术检测关键通路蛋白表达；通过免疫组化（IHC）分析肿瘤组织中特定蛋白的表达与定位；以及使用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞因子CXCL5的分泌水平。

TSZAF mc在体外抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡

研究人员首先在体外评估了TSZAF mc对肺癌细胞的影响。结果表明，TSZAF mc能显著抑制人源CTC-TJH-01细胞和小鼠LLC细胞的增殖活力。同时，该组合物能有效诱导这两种细胞发生凋亡。在细胞迁移和侵袭实验中，TSZAF mc处理组的细胞穿过小室膜的能力明显减弱，说明其能强力抑制细胞的迁移和侵袭能力，这些是肿瘤转移的关键步骤。

TSZAF mc在体内抑制肺癌生长和转移

为了验证体外结果，研究团队建立了LLC小鼠模型。体内实验发现，经TSZAF mc治疗后，小鼠皮下移植瘤的生长受到显著抑制，肿瘤体积和重量明显减小。更重要的是，通过观察肺转移结节的数量，发现TSZAF mc治疗组小鼠的肺转移灶显著少于对照组，充分证明了TSZAF mc在体内具有强大的抗肿瘤生长和抗转移功效。

TSZAF mc抑制Wnt/β-catenin信号通路和CXCL5的表达

机制探讨是本研究的核心。Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路是调控细胞增殖、分化和肿瘤发生发展的经典通路，其异常激活与肿瘤转移密切相关。研究发现，TSZAF mc处理后，肺癌细胞和肿瘤组织中的β-catenin蛋白的核转位（进入细胞核发挥转录激活作用）被有效阻断，其下游靶基因（如c-Myc和Cyclin D1）的表达也随之下降。这表明TSZAF mc能够抑制Wnt/β-catenin信号通路的异常活化。此外，研究还发现TSZAF mc能显著降低一种重要的趋化因子CXCL5在细胞上清液和肿瘤组织中的表达水平。

TSZAF mc减少中性粒细胞在转移灶中的浸润

CXCL5的主要功能是招募中性粒细胞至炎症或肿瘤部位。肿瘤相关中性粒细胞在肿瘤微环境中通常发挥促进肿瘤进展和转移的作用。本研究通过免疫组化分析发现，在TSZAF mc治疗组的肿瘤组织，特别是肺转移灶中，中性粒细胞的浸润数量显著减少。这直接将TSZAF mc抑制CXCL5表达与减少中性粒细胞招募的生物学效应联系起来。

综上所述，本研究得出以下结论：中药调神治癌方的主要活性单体组合（TSZAF mc）能有效抑制肺癌细胞的恶性生物学行为（增殖、迁移、侵袭）并诱导其凋亡；在动物体内能显著抑制肿瘤生长和肺转移。其作用机制是通过双重调控实现的：一方面直接抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化，影响肿瘤细胞自身的命运；另一方面通过下调趋化因子CXCL5的表达，减少其对中性粒细胞的招募，从而改变肿瘤微环境，削弱其促转移能力。这项研究不仅从现代科学角度阐明了中药复方TSZAF抗肺癌转移的药效物质基础和分子机制，为其中医药理论的“清热解毒、扶正祛邪”提供了现代生物学证据，而且为开发基于中药活性成分的新型抗肿瘤转移药物提供了重要的候选策略和理论依据，具有显著的临床应用潜力和转化价值。