SIRT1通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路恢复自噬流以抵抗多柔比星诱导的MCF-7细胞衰老

本研究揭示SIRT1通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路激活自噬流，显著逆转多柔比星（DOX）诱导的MCF-7细胞衰老。研究发现SIRT1可降低衰老标志蛋白p53/p21表达和SA-β-Gal活性，并通过自噬抑制剂CQ验证其抗衰老作用依赖自噬功能。该机制为肿瘤治疗中化疗诱导衰老的调控提供了新靶点。

　　

Section snippets

Cell lines and culture

人乳腺癌细胞系MCF-7购自暨南大学医学院（广州，中国）。细胞培养方法参照先前描述[37]。使用Turbofect?转染试剂进行基因操作，该试剂购自Invitrogen，严格遵循制造商 protocol 以实现最佳转染效率。

Plasmid constructs

质粒pCDNA3-CFP（CFP）（#13030）购自Addgene（美国马萨诸塞州剑桥市）。

DOX induced cellular senescence

为评估多柔比星（DOX）的细胞毒性效应，我们首先采用CCK-8法检测细胞活力。用浓度梯度DOX（0、0.05、0.1、0.2、0.5、1、2和5 μM）处理MCF-7细胞24小时。如图1A所示，DOX以剂量依赖方式显著降低细胞活力。值得注意的是，0.2 μM DOX仅引起轻微活力下降（约97% vs 对照组），因此选择该亚致死浓度进行后续衰老诱导实验。

Discussion

本研究揭示了一个前所未有的机制：SIRT1通过激活自噬抵抗DOX诱导的MCF-7细胞衰老。SIRT1抑制PI3K/AKT/mTOR通路——这条通路是自噬调控的关键途径，从而对抗DOX引发的衰老。特别重要的是，我们发现SIRT1特异性地拯救了DOX诱导的自噬流阻滞（发生在溶酶体降解阶段），而不仅仅是增强自噬启动。

CRediT authorship contribution statement

Ge Wu: 综述编辑/原稿撰写·可视化·验证·方法论·研究实施·形式分析·数据管理·概念化 Wei Yao: 软件·形式分析·数据管理 Lin Cheng: 方法论 Xiaoping Wang: 资金获取·概念化 Tongsheng Chen: 综述编辑/原稿撰写·监督·资源·项目管理·方法论·研究实施·资金获取·形式分析·数据管理

Funding

本研究由国家自然科学基金（编号62135003和62275103）、广东省重点领域研发计划（编号2022B0303040003）以及松山湖材料实验室开放研究基金（2023SLABFK12）资助。

Declaration of competing interest

作者声明不存在可能影响本研究结果的已知竞争性经济利益或个人关系。