葡萄籽原花青素B2作为新型ACLY抑制剂的发现及其体外降脂机制研究

本研究针对ACLY直接抑制剂稀缺的难题，从功能食品葡萄籽中筛选出新型天然抑制剂原花青素B2（IC50=2.73μM），通过生物物理验证、酶动力学模拟及细胞实验证实其通过非竞争性抑制ACLY调控脂质代谢，为降脂药物研发提供了新候选化合物和作用机制参考。

　　

在代谢性疾病日益流行的今天，脂质代谢紊乱已成为心血管疾病的重要诱因。ATP柠檬酸裂解酶（ATP citrate lyase, ACLY）作为连接糖代谢与脂质合成的关键酶，催化胞内柠檬酸生成乙酰辅酶A——这一过程是脂肪酸和胆固醇生物合成的核心枢纽。尽管ACLY被视为理想的降脂靶点，目前仅有前体药物bempedoic acid获批准上市，直接靶向ACLY的高效抑制剂仍极度匮乏。天然产物作为药物发现的宝库，其中葡萄籽因其在功能食品和药物中的应用历史悠久，且具有明确的降脂功效，但其活性成分是否直接作用于ACLY尚不明确。这一科学空白促使研究者开展系统性探索。

本研究采用多组分筛选策略、差示扫描荧光法（DSF）、酶动力学分析、分子动力学模拟及细胞水平脂质积累检测等技术，以葡萄籽提取物为研究对象。

研究结果首先通过多组分筛选发现，从葡萄籽中鉴定出的原花青素B2对ACLY活性具有显著抑制效果，其半抑制浓度（IC₅₀）为2.73μM。差示扫描荧光法（differential scanning fluorimetry, DSF）实验结果证实，原花青素B2能够直接与ACLY蛋白结合，引起蛋白热稳定性变化，表明二者之间存在特异性相互作用。酶动力学研究表明，原花青素B2以非竞争性抑制方式作用于ACLY，提示其结合位点不同于底物催化中心，这一特性为别构抑制剂开发提供了新思路。分子动力学模拟进一步揭示，原花青素B2与ACLY蛋白结合模式稳定，关键氨基酸残基参与相互作用，从计算生物学角度支持了其结合可靠性。在细胞水平上，原花青素B2处理显著降低了肝细胞内的脂质积累，并通过抑制ACLY下游关键转录因子的活性，调控脂质合成通路，证实了其功能性作用。

本研究结论表明，原花青素B2是首个从葡萄籽中发现的直接ACLY天然抑制剂，其通过非竞争性抑制机制及调控转录因子网络发挥降脂作用。该发现不仅揭示了葡萄籽降脂功效的物质基础，为功能食品开发提供科学依据，更重要的是为ACLY靶向药物研发提供了具有新颖骨架的先导化合物。分子动力学模拟揭示的结合特征为优化抑制剂设计指明了方向。论文发表于《Fitoterapia》，对天然产物来源的代谢性疾病治疗剂开发具有重要参考价值。