基于双模式阴离子交换色谱策略的多维度分析揭示电荷异质性对度拉糖肽结构与功能的显著影响

本综述系统阐述了采用双模式半制备阴离子交换色谱（AEX）分离技术对GLP-1受体激动剂度拉糖肽及其候选生物类似药电荷变异体的深度解析。研究通过整合AKTA纯化系统与半制备高效液相色谱（HPLC），实现了高纯度、低成本的电荷变异体制备，并深入探讨了翻译后修饰（PTMs）（如磷酸化、唾液酸化）与聚集态对生物活性（GLP-1R/FcRn）的影响，为复杂蛋白药物的电荷异质性（CQA）研究提供了创新性解决方案。

　　

Highlight

电荷异质性作为生物药物开发中的关键质量属性（CQA），需通过精准表征确保产品质量与疗效。度拉糖肽作为酸性Fc融合蛋白，其电荷变异体分析面临分子复杂性与技术局限性的双重挑战。本研究开发的双模式半制备阴离子交换色谱（AEX）方法，成功实现了电荷变异体的高纯度分馏，为解析结构差异与功能影响提供了新视角。

Results and discussion

电荷变异体是蛋白质常见特征，也是生物类似药相似性评价的核心指标。研究发现，候选生物类似药与原研药（Trulicity?）在酸性变异体上存在微小差异，可能与磷酸化、唾液酸化修饰程度相关。碱性变异体中聚集态主要通过非共价作用形成，而酸性变异体中存在共价聚集态。尽管电荷变异体对生物活性影响较小，但聚集体的存在可能潜在影响功能。通过综合表征技术（包括尺寸异质性、相关物质及生物活性分析），研究揭示了微观异质性的结构基础，并建立了关键构效关系。

Conclusions

本研究建立的双模式AEX策略为度拉糖肽电荷变异体分离提供了高效、低成本且仪器兼容性强的解决方案。通过整合多维度结构表征与功能评估（GLP-1R/FcRn结合活性），首次系统阐明了度拉糖肽电荷异质性的结构驱动因素与功能相关性，为复杂治疗性蛋白的质控与开发提供了重要技术平台。

（注：根据要求已去除文献引用标识[1][2]等及图示标识，专业术语保留英文缩写与上下标格式）