冷冻与时限效应：离体时间、细胞密度及冻存技术对异基因干细胞移植物（allogeneic stem cell grafts）存活力的影响机制研究

本研究系统分析了586例异基因外周血干细胞移植物（PBSC grafts），揭示离体时间（ex vivo time）与细胞浓度对移植物组分存活力的关键影响。研究发现CD34+干细胞冻存后仍保持高存活率（84.5%），而T细胞（CD3+/CD4+/CD8+）对冻存过程极为敏感。研究提出PM-Index作为评估冻存后T细胞存活力的预测指标，为优化移植物处理流程提供了重要依据。

　　

Highlight

尽管CD34⁺干细胞展现出强大的抗冻超能力（冻存后存活率84.5%），T细胞团队却成了低温挑战下的"脆弱战士"——冻存后CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺细胞存活率分别骤降至65.8%、60.0%和74.5%。更有趣的是，离体时间就像个"隐形杀手"，其破坏效果对T细胞（R2=0.167）远比CD34⁺细胞（R2=0.038）更凶猛！而高细胞浓度则化身"细胞健身房"，显著提升CD45⁺和T细胞群体的生存韧性。

INTRODUCTION

造血干细胞（HSC）移植就像一场精密编排的星际任务，需要协调供体干细胞采集、预处理方案、移植物资运输和潜在后期处理。在COVID-19大流行初期，传统供应链中断导致移植物流通陷入危机，这直接催生了全球范围内的冻存保底方案——确保我们能接收到足够且具有活力的"细胞特快专递"。

Patient selection

2010年4月至2023年12月期间，多伦多玛格丽特公主癌症中心Philip S. Orsino细胞处理实验室连续检测了586例异基因外周血干细胞移植物。通过流式细胞术这位"细胞侦探"，我们在移植物资到货时和解冻后对其进行了全面"体检"，所有数据均来自常规质量分析流程（补充图1）。供体采集国家被划分为四大区域：美洲、欧洲、亚洲和本地（加拿大），就像一场横跨全球的"细胞接力赛"。

Descriptive Analysis

在这项跨越44个月的大型研究中，586例PBSC移植物接受了流式细胞术的精密扫描。其中131例经历了液氮冷冻的"极寒考验"。移植物资来源分布宛如世界地图：美洲（14.3%）、亚洲（0.9%）、欧洲（43.5%）和本地（41.3%）。值得注意的是，无关供者（URD） grafts中高达97.2%来自国际捐赠，而同胞全相合（SIB）和单倍体相合（HAPLO）移植物资则主要来自本地（分别为77.8%和93.6%），这仿佛勾勒出一幅"细胞全球化"与"本地化"并存的生动图景。

DISCUSSION

这项研究堪称异基因HSC移植物细胞组成分析的"里程碑式探索"。我们的数据显示：离体时间是影响细胞存活的关键变量，而CD34⁺干细胞就像"细胞界的耐寒冠军"，T细胞则更像"温度敏感型精英"。特别有趣的是，细胞浓度扮演着"细胞保护盾"的角色——更高浓度的细胞团块能显著提升免疫细胞（尤其是CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺群体）的冻存生存率。我们创新的PM-Index（结合离体时间与细胞浓度）就像个"细胞存活预测神器"，为未来优化移植物处理流程提供了精准导航。