印度首次检出沃尔夫钩端螺旋体：阿萨姆邦发热伴黄疸暴发的病原学与共感染研究

本研究报告了2024年印度阿萨姆邦发热伴黄疸暴发的病原学调查，首次在印度东北部人源临床样本中鉴定出沃尔夫钩端螺旋体（L. wolffii），揭示了甲型肝炎病毒（HAV）与钩端螺旋体共感染现象。通过血清学检测（IgM ELISA）和分子技术（16S rRNA PCR测序），研究证实了L. wolffii的致病潜力及跨境传播风险，为突发公共卫生事件应对和新发病原监测提供了关键科学依据。

　　

^Highlight

^研究背景

2024年2月至3月期间，印度阿萨姆邦Goalpara地区暴发了不明原因的发热伴黄疸疫情，出现多例死亡病例。本研究旨在确定导致该暴发的病原体，以指导公共卫生干预措施。

^研究方法

收集30例患者的临床样本，采用血清学和分子技术进行分析。使用IgM ELISA试剂盒进行甲型肝炎病毒（HAV）、戊型肝炎病毒（HEV）和钩端螺旋体（Leptospira）的血清学检测。提取钩端螺旋体DNA，通过靶向16S rRNA基因的PCR进行扩增，并采用下一代测序（NGS）进行进一步分析。

^研究结果

结果显示，23.33%（7/30）的病例检出HAV IgM抗体，40%（12/30）的病例通过ELISA检测为钩端螺旋体特异性IgM阳性。此外，16.67%（5/30）的病例同时感染HAV和钩端螺旋体，增加了临床复杂性。通过PCR扩增和系统发育分析，在阳性样本中鉴定出沃尔夫钩端螺旋体（L. wolffii），这是印度东北部首次在人源临床样本中报告该病原体。L. wolffii属于钩端螺旋体P2亚支，近年来因其致病潜力受到全球关注。

^结论

本研究结果表明，L. wolffii具有较强的致病潜力，并可能通过跨境传播自孟加拉国传入该地区。结果强调了加强对人类和动物中新兴钩端螺旋体株（尤其是L. wolffii）的监测与研究的必要性，以进一步了解其流行病学、致病机制及对公共卫生的影响。

^Introduction

钩端螺旋体病由钩端螺旋体属（Leptospira spp.）引起，全球每年感染超过百万人，导致6万人死亡[1]。该水源性疾病常见于热带和亚热带地区，通过接触感染动物尿液或污染环境传播[2]。钩端螺旋体为革兰阴性需氧螺旋体，至少包括72个种，分为致病性和腐生性支系[3,4]。致病性支系进一步分为P1和P2亚支[5]。P1亚支包括问号钩端螺旋体（L. interrogans）、博氏钩端螺旋体（L. borgpetersenii）和克氏钩端螺旋体（L. kirschneri），是钩端螺旋体病的主要病原[6]。而2008年才被命名的L. wolffii近年来引起全球关注[7]。

甲型肝炎病毒（HAV）是一种属于小RNA病毒科的单链RNA病毒，每年全球约有150万感染病例[8]。在7个HAV基因型中，4个（I、II、III和VII）来源于人类，3个（IV、V、VI）来源于非人灵长类[9]。HAV通过污染的食物、水源、不良卫生条件或与感染者密切接触传播[10]。常见症状包括发热、不适和黄疸，其他表现如恶心、呕吐、腹痛和疲劳[8,11]。

2024年2月至3月，位于距古瓦哈提约130公里、迪布鲁格尔约600公里的阿萨姆邦Goalpara地区五个村庄暴发热症和轻度黄疸，并出现死亡病例（图1）。鉴于该疾病的并发症，我们开展了本次调查以确定病因，并为公共卫生干预提供依据。

^{Section snippets}

^{Study participants}

2024年3月，我们在阿萨姆邦Goalpara地区距城镇约20–25公里的村庄开展了一起疑似黄疸暴发的调查。来自Regional VRDL, ICMR-RMRC, Dibrugarh的工作组共调查41例病例，其中11例因未知感染和轻度黄疸死亡。样本采集自受影响村庄和Goalpara Civil Hospital。患者表现为发热，伴有头痛、肌痛、恶心、巩膜黄染和黄疸，症状出现时间为1–10天。

^{Serological findings and PCR}

在30例样本中，7例（23.33%）通过ELISA检测为HAV IgM阳性，1例（3.33%）为可疑；HEV IgM检测发现2例阳性（7.67%）。钩端螺旋体IgM ELISA显示40.0%（12/30）阳性，另有6例（20.0%）为可疑。在有症状的20例中，9例（45%）钩端螺旋体IgM阳性，5例（25%）可疑；无症状10例中，3例阳性，1例可疑。15例尿液样本中，8例（53.33%）通过16S rRNA PCR检出钩端螺旋体DNA。

^Discussion

钩端螺旋体病是一种人畜共患病，主要传播途径为接触感染动物尿液或污染水体[2,18]。其临床表现多样，可从轻型到重型，包括发热、黄疸、肌痛、头痛、食欲不振、咳嗽和腹痛[19]。多数病例无黄疸表现，但严重者可表现为韦尔病（Weil’s disease），特征为黄疸或明显黄疸、肾功能衰竭伴少尿、出血并发症和呼吸窘迫[20,21]。本研究在暴发地区观察到发热、黄疸、肌痛和头痛等症状，与钩端螺旋体感染典型表现一致。

值得注意的是，本研究首次在印度东北部地区人源临床样本中报告了L. wolffii。该菌于2013年在马来西亚一名发热患者中首次分离[15]，此后在泰国、斯里兰卡和孟加拉国也有报道[16,17,22,23]。我们的系统发育分析显示，本次暴发中的分离株与孟加拉国流行株聚为一支，提示可能存在跨境传播。

此外，研究还发现HAV和钩端螺旋体共感染现象，尤其是5例患者同时感染两种病原，增加了诊断和治疗的复杂性，尤其在资源有限地区。

^Conclusion

综上，本研究确定了印度阿萨姆邦Goalpara地区一起不明原因发热伴黄疸症状并导致死亡的暴发疫情，与HAV和钩端螺旋体共感染有关，并首次在印度东北部人源临床样本中检出L. wolffii。作为控制措施的一部分，建议受影响村庄居民使用安全饮用水，并推荐采用多西环素（200mg，每周一次）进行预防性抗生素治疗。