异噻唑啉酮类杀菌剂对人神经元细胞的神经毒性机制研究：从基因表达到通路分析的深入洞察

本研究系统评估了四种常见异噻唑啉酮类杀菌剂（BIT、MIT、OIT、DCOIT）对人源神经细胞的毒性效应，通过RNA测序（RNA-seq）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析，首次揭示其在亚细胞毒性浓度下即可通过调控神经发育相关基因（如ANXA2/SYTL5）和激活神经退行性疾病相关通路诱发神经毒性，为修订人体暴露安全评估标准提供了关键分子证据。

　　

材料

Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）、胎牛血清（FBS）、青霉素/链霉素（p/s）和胰蛋白酶/EDTA购自Gibco公司（美国马萨诸塞州）。磷酸盐缓冲盐水（PBS）购自Corning公司（纽约）。二甲基亚砜（DMSO）、视黄酸（RA）、N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC；CAS# 616-91-1, A7250）、BIT、MIT和OIT购自Sigma-Aldrich公司（美国密苏里州）。DCOIT购自东京化学工业株式会社（日本东京）。

人神经元细胞中BIT、MIT、OIT和DCOIT的细胞毒性

通过处理人SH-SY5Y细胞24小时评估不同浓度（0.001–10 μg/mL）BIT、MIT、OIT和DCOIT的细胞活性（图1a）。四种异噻唑啉酮均呈现剂量依赖性的细胞活性下降（图1b）。DCOIT在0.1 μg/mL起即引起显著活性下降（p < 0.05），BIT和OIT从0.5 μg/mL开始显著降低活性，MIT则从1 μg/mL开始显现效应。

讨论

尽管异噻唑啉酮毒性的证据不断积累，但其神经损伤机制仍不明确。本研究首次系统比较并探讨了BIT、MIT、OIT和DCOIT四种异噻唑啉酮的神经毒性潜力及其作用机制。

鉴于异噻唑啉酮在各类产品和环境中的广泛使用与检出，理解其细胞毒性至关重要。细胞活性分析表明...

结论

本研究评估比较了BIT、MIT、OIT和DCOIT对人源神经细胞的影响。虽然细胞毒性顺序为MIT < BIT < OIT < DCOIT，但所有异噻唑啉酮在非细胞毒性浓度下均可诱发神经毒性。四种物质均显著抑制神经突生长，并改变与神经发育、分化和生长相关基因的表达，表明其通过干扰神经发育过程诱导神经毒性。