浓绿茶饮料微生物生态研究：口腔菌群生长模式与储存安全性评估

本研究通过唾液接种实验评估了六种市售浓绿茶饮料（Bold Oi Ocha?等）的抗菌特性。结果显示60%以上样品在37°C储存24小时后细菌浓度＜103 CFU/mL，其抑菌效果与茶多酚浓度无明确线性关系。研究发现乳杆菌属（Lactobacillus）菌株在特定条件下成为优势菌群（占比37.6-100%），揭示了浓绿茶对口腔微生物组的调控潜力，为饮料安全储存提供科学依据。

　　

Highlight

方法

采集14名参与者（19-25岁）的静息全唾液，将稀释唾液样本（5.0×10⁵ CFU/mL）各1.0 mL接种至含280 mL绿茶的塑料瓶（包括六种浓绿茶饮料）。样品于37°C储存24小时后，取1.0 mL接种血琼脂平板，在37°C厌氧培养。通过基因组DNA提取和16S rDNA测序鉴定细菌种类。

结果

六种浓绿茶饮料（Bold Oi Ocha?、Suntory Bold Green Tea Iyemon?、Bold Oi Ocha Premium Strong?、Healthya?、Bold Ayataka?和Catechin Green Tea?）中超过60%的样品在储存1天后呈现低细菌水平（＜10³ CFU/mL）。值得注意的是，在部分样本中，原本占口腔微生物组少数的乳杆菌属（Lactobacillus）历史成员——如柠檬乳杆菌（Limosilactobacillus）和植物乳杆菌（Lactiplantibacillus）物种——特异性地成为优势菌群（占比37.6-100%）。

结论

尽管儿茶素的抗菌作用可能影响总菌落数和菌群组成，但未观察到总茶儿茶素浓度与细菌生长抑制效果之间存在明确相关性。

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采样

14名健康参与者（a至n编号）在采样前3个月内未使用抗生素。按既往方法[1,4]收集静息全唾液，使用细菌计数器（Panasonic公司）通过光电测量法量化细菌浓度。将各唾液样本用PBS稀释至5.0×10⁵ CFU/mL备用。

结果

将10³ CFU/mL口腔细菌接种至六种浓绿茶及普通绿茶饮料中。超过60%的浓绿茶样品（包括Bold Oi Ocha?、Suntory Strong Green Tea Iyemon?等）在一天储存后呈现较低细菌水平（＜10³ CFU/mL）。特别在Bold Oi Ocha?和Healthya?中，约80%样本保持该抑菌水平。

讨论

浓绿茶饮料比普通绿茶更能有效抑制口腔细菌生长（表1、2）。除特定产品外，这些饮料的总儿茶素浓度范围为0.80-1.54 mg/mL。儿茶素虽具抗菌特性，但其作用效果受多种因素调控。

结论

六种浓绿茶饮料多数样本在储存后保持低菌水平，主要生长的优势菌为口腔链球菌属（Streptococcus）细菌。相比之下，普通绿茶（Oi Ocha?）约60%样本出现显著细菌增殖（＞10⁵ CFU/mL）。

伦理批准

研究获日本东北大学齿学研究伦理委员会批准，所有参与者均签署知情同意书。

利益冲突声明

作者声明无利益冲突。

致谢

研究得到正志社基金会（Imai）、JST SPRING项目号JPMJSP2121（Kawachi）、佐佐木环境技术基金会（Wakui）及日本学术振兴会科研基金（项目号23K16405等）支持。感谢Forte公司提供英文编辑服务。