YAP通过维持钙稳态与线粒体功能调控鹿茸软骨细胞肥大与凋亡的机制研究

本研究发现YAP（Yes-associated protein）在鹿茸软骨细胞中高表达，并通过调控钙稳态与线粒体功能影响软骨细胞肥大与凋亡。研究揭示YAP失活会通过YTHDF2增强IP3R1/2 mRNA稳定性，导致胞质Ca2+积累，激活PPP3R1/NFATC通路并升高线粒体Ca2+水平，进而诱导线粒体功能障碍和mtROS泄漏，最终抑制软骨细胞肥大并促进凋亡。该研究为骨骼再生与软骨疾病提供了新的机制见解。

　　

Section snippets

Antler tissue collection

鹿茸组织采集自3岁健康梅花鹿的生长尖端，操作流程参照先前研究方法[13]。组织经矢状面纵向切割后，部分用于原位杂交实验，其余部分用于分离软骨细胞。所有动物实验均经吉林大学动物伦理委员会批准（SY201905030）。

Treatment of antler chondrocytes

鹿茸软骨细胞分离方法参照先前描述[13]，后续实验采用特定条件进行培养和处理。

Effects of YAP on the hypertrophy and apoptosis of antler chondrocytes

为探究YAP与鹿茸再生的关系，我们检测了其在鹿茸组织中的表达。原位杂交结果显示YAP mRNA信号主要存在于鹿茸真皮成纤维细胞、间充质细胞和软骨细胞中（图1A）。免疫荧光显示YAP蛋白在鹿茸软骨细胞核内明显定位（图1B）。使用YAP抑制剂VP处理可抑制YAP表达，并降低YAP/TEAD转录活性。

Discussion

YAP在软骨形成和软骨内成骨过程中不可或缺，但其在鹿茸软骨细胞肥大中的作用尚未明确。本研究显示YAP活性减弱会阻碍鹿茸软骨细胞向肥大软骨细胞分化。与之一致的是，YAP缺失会加剧骨关节炎（OA）进程中的软骨破坏，并削弱间充质干细胞（MSCs）的增殖能力，同时伴随细胞衰老和软骨形成能力受损[27,28]。相反，YAP激活则表现出保护作用。

Conclusion

YAP对鹿茸软骨细胞的肥大和凋亡过程至关重要，并参与鹿茸软骨发育。YAP失活可能通过增强YTHDF2介导的IP3R1/2 mRNA稳定性诱导胞质Ca²⁺积累，进而激活PPP3R1/NFATC通路促使线粒体Ca²⁺水平升高。这导致线粒体功能障碍，并通过mPTP（线粒体通透性转换孔）促进mtROS向胞质泄漏，最终引发脂质过氧化、软骨细胞肥大缺陷及细胞凋亡增加。