中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）与动脉瘤性蛛网膜下腔出血后迟发性脑缺血（DCI）的关联性研究

本研究发现，在急性蛛网膜下腔出血（SAH）患者中，中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）特异性血浆标志物（H3Cit-DNA和MPO-DNA复合物）的升高轨迹与迟发性脑缺血（DCI）的发生显著相关。该研究通过前瞻性队列设计和广义估计方程（GEE）分析，揭示了NETs可能作为DCI的早期预测标志物及潜在治疗靶点，为SAH继发性神经损伤机制提供了新的免疫血栓形成视角。

　　

Abstract

本研究针对自发性蛛网膜下腔出血（SAH）后发生的迟发性脑缺血（DCI）这一临床难题展开探讨。近年研究表明，中性粒细胞通过形成中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）介导的免疫血栓形成可能参与DCI病理过程。研究旨在评估急性SAH患者NET生物标志物的动态轨迹是否与DCI发生相关。

Background

SAH占所有脑卒中类型的5%，但其致残致死率却高达三分之一。DCI作为SAH后主要继发性损伤因素，可使不良预后风险增加5倍。传统观点认为脑血管痉挛是DCI主因，但针对血管痉挛的治疗效果有限，表明存在其他关键机制。中性粒细胞介导的炎症反应被证实参与SAH后组织损伤过程，而NETs作为中性粒细胞活化后释放的DNA-组蛋白-颗粒蛋白复合物，可通过引发微血栓形成和内皮损伤促进缺血性损伤。动物模型显示NETs与微血管痉挛及DCI存在关联，但临床研究受限于检测方法特异性不足（如使用血清样本或非特异性标志物）。

Methods

本研究采用前瞻性单中心观察性设计，纳入发病48小时内的SAH患者。排除近期心脑血管事件、自身免疫性疾病、活动性癌症等干扰因素后，最终纳入40例患者（平均年龄57岁，53%为女性，80%为动脉瘤性SAH）。通过酶联免疫吸附法（ELISA）检测入院时（基线）、第5天和第10天血浆中的NET特异性标志物：瓜氨酸化组蛋白H3-DNA复合物（H3Cit-DNA）、髓过氧化物酶-DNA复合物（MPO-DNA）、细胞游离DNA（cfDNA），同时测定NET形成关键酶肽基精氨酸脱亚胺酶4（PAD4）和DNA分解酶脱氧核糖核酸酶活性。DCI判定采用神经危重症学会共识标准，由三名 blinded 专家通过临床和影像学资料（CT/MRI）共同确认。

Results

12例（30%）患者发生DCI。基线时两组NET标志物水平无显著差异。至第5天，DCI组较非DCI组呈现显著升高的H3Cit-DNA（63 ng/mL vs 31 ng/mL, P=0.049）、MPO-DNA（5.9 ng/mL vs 0.4 ng/mL, P=0.029）和cfDNA（651 ng/mL vs 515 ng/mL, P=0.04）水平，第10天有所回落。广义估计方程（GEE）分析显示DCI组存在H3Cit-DNA（第5天β=0.7, P=0.01）和MPO-DNA（第5天β=3.1, P<0.001）的显著升高轨迹，而非DCI组MPO-DNA呈现下降趋势（P<0.001）。PAD4和脱氧核糖核酸酶活性在两组间无差异。亚组分析显示动脉瘤性SAH患者中MPO-DNA轨迹变化与主分析一致。

Conclusions

本研究首次在SAH患者血浆中检测到NET特异性标志物的动态升高，且其峰值出现于DCI临床发病之前（第5天），提示NETs可能作为DCI的早期生物标志物和潜在致病机制。该发现为开发靶向NETosis的干预策略（如JAK抑制剂、脱氧核糖核酸酶治疗）提供了时序依据，但仍需大样本研究验证其临床转化价值。

Research Perspective

What Is New?

• NET关键成分（H3Cit-DNA、MPO-DNA）在SAH患者中显著升高，尤其在DCI患者中更为明显

• NETs升高发生于脑血管痉挛前期，提示其可能参与DCI的起始环节而非继发现象

What Question Should Be Addressed Next?

• 需明确SAH患者NET活性升强的具体触发因素（如红细胞裂解产物、炎症因子）

• 探索NETs通过微血栓形成、内皮功能障碍等途径参与DCI的具体机制

• 通过临床前研究验证早期NET抑制（如脱氧核糖核酸酶）对DCI的预防效果

LIMITATIONS

研究存在单中心小样本、影像学检查以CT为主、未校正治疗方式及院内感染等混杂因素的局限性。血浆NET水平能否反映中枢神经系统NETs活性仍需进一步验证。