Lumipulse血浆p-tau217与Aβ42/40联合检测：疾病修饰疗法前Aβ阳性的高精度确认新策略

本研究通过Lumipulse平台证实，血浆磷酸化tau（p-tau217）与Aβ42/40比值联合检测可高效预测淀粉样蛋白（Aβ）PET阳性状态，曲线下面积（AUC）达0.961，灵敏度93%、特异性92%，为阿尔茨海默病（AD）疾病修饰疗法（DMT）前的Aβ阳性确认提供了可靠、微创的血液生物标志物（BBM）解决方案。

　　

背景

随着疾病修饰疗法（DMT）如lecanemab和donanemab获批准用于阿尔茨海默病（AD）治疗，快速准确地确认患者Aβ阳性状态成为临床迫切需求。当前DMT资格基于临床试验入组参数，亟需开发适用于分级或确认性血液检测的切点。尽管基于质谱的血液生物标志物（BBM）在预测Aβ状态方面表现出色，但其临床和分析有效性仍存在显著差距，尤其在 underrepresented 种族群体中证据不足。近期共识声明定义了BBM预测异常Aβ水平的最低性能标准：若匹配脑脊液（CSF）生物标志物性能（约90%灵敏度和特异性），可作为确认性检测；若灵敏度≥90%、特异性≥85%（初级保健）或75%-85%（二级保健），则可用作分级检测。单一切点需在Aβ+患病率约50%的人群中实现至少90%的灵敏度和特异性，而双切点方法可优化性能，但可能产生中间区（intermediate zone），建议比例<15%-20%。

方法

研究选取澳大利亚成像、生物标志物与生活方式（AIBL）老龄化研究的两个亚队列：AD连续谱队列（ADCC）和意向治疗队列（ITTC）。ADCC包括认知未受损（CU）Aβ-（N=75）、CU Aβ+（N=48）、轻度认知障碍（MCI）Aβ+（N=26）和AD Aβ+（N=48）参与者，旨在评估AD连续谱中血浆生物标志物水平。ITTC模拟符合DMT条件的初级/二级保健患者群体，包括MCI Aβ+（N=65）、AD Aβ+（N=61）、MCI Aβ-（N=59）和AD Aβ-（N=15）。所有参与者血液样本采集于空腹状态下，使用含前列腺素E₁的K3-EDTA管防止血小板活化，离心后血浆于液氮气相储存。样本经单次冻融后，在Labcorp-Monogram临床参考实验室使用Fujirebio Lumipulse G1200仪器分析Lumipulse血浆Aβ42、Aβ40和p-tau217 assay。两个队列检测间隔约12个月，通过40样本桥接研究标准化数据。Aβ PET成像采用¹¹C-PiB、¹⁸F-NAV4694、¹⁸F-Flutemetamol或¹⁸F-florbetapir示踪剂，结果标准化至Centiloid（CL）尺度，Aβ PET阳性定义为CL≥25。统计分析采用受试者工作特征（ROC）曲线、德隆检验、最小绝对收缩和选择算子（LASSO）等方未能，评估生物标志物单独或组合（比值、线性模型、复合评分）预测Aβ PET状态的性能，并计算单切点（Youden指数）和双切点（设定90%、92.5%、95%灵敏度和特异性）下的中间区比例、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）和准确度。

结果

ADCC中Aβ PET阳性率为62%，ITTC为63%。所有生物标志物（Aβ42、p-tau217、Aβ42/40比值、p-tau217/Aβ42比值）在Aβ PET+组均显著改变（p<0.001）。桥接研究显示 assay 间一致性高（concordance correlation 0.93-0.99），ITTC数据经Deming回归方程转换至ADCC尺度。相关性分析表明，Aβ42/40与CL呈中度负相关（ADCC Rho=-0.507，ITTC Rho=-0.602），p-tau217及其与Aβ42比值与CL强相关（Rho=0.723-0.753）。ROC分析显示，ADCC中p-tau217和p-tau217/Aβ42比值AUC最高（0.941和0.961），ITTC中p-tau217/Aβ42比值AUC达0.959。复合评分（含年龄、性别、APOE ε4、Aβ42、Aβ42/40、p-tau217）或p-tau217与Aβ42/40线性组合在两地队列中均显着优于单独p-tau217（名义p≈0.01）。临床前AD亚组（CU，Aβ+患病率39%）中，p-tau217/Aβ42比值AUC为0.943，线性组合和复合评分AUC更高（0.954和0.957）。单切点分析显示，p-tau217/Aβ42比值在ADCC和ITTC的准确度分别为93%和95%，灵敏度/特异性为93%/92%和99%/86%。双切点（95%灵敏度和特异性）下，p-tau217中间区比例在ADCC和ITTC分别为17%和23%，p-tau217/Aβ42比值则为9%和13%，而复合评分或线性组合在ITTC无中间区（Youden指数>95%）。切点值因队列而异，如p-tau217在ADCC和ITTC的Youden切点分别为0.1795 pg/mL和0.2534 pg/mL。

讨论

本研究证实Lumipulse p-tau217和Aβ42/40 assay在预测Aβ PET状态方面具有高精度，尤其p-tau217/Aβ42比值、其与协变量线性组合或复合评分性能最优，满足共识声明确认性检测标准。ITTC中特异性提高可能源于认知障碍人群更高的tau负荷。相比单独p-tau217，组合策略减少了中间区比例（如p-tau217/Aβ42比值在ADCC仅9%），提高了临床实用性。切点差异反映了人群设计（认知状态、Aβ负担）和检测变异的影响，强调 cut-off 开发需针对特定用途人群。双切点方法提供了灵活性，但中间区管理需临床判断。Lumipulse p-tau217/Aβ42比值 assay 近期获FDA批准为首个AD辅助诊断体外检测，但临床应用需注意：1）Aβ PET本身存在测量误差；2）美国FDA批准视觉读片与CL-based PET阳性不完全一致。研究局限性包括队列间检测时间差导致的p-tau217均值差异，以及人群以澳大利亚白人为主，未来需在多样化和国际人群中验证。总之，Lumipulse BBM组合可匹配CSF性能，为DMT筛选提供可靠、微创的确认工具。