揭示mRNA疫苗编码HPV16 E7与IL-12协同抗头颈癌的免疫机制及抗转移效应

本研究通过mRNA疫苗技术，将HPV16 E7抗原与细胞因子IL-12和GM-CSF联合应用，显著抑制mEER模型肿瘤生长并增强抗肿瘤免疫。研究证实局部表达IL-12可避免系统性毒性，诱导抗原特异性记忆T细胞形成，为HPV阳性头颈癌治疗提供新策略。

　　

Section snippets

Cell culture

mEER细胞是表达HPV16型E6/E7致癌蛋白和hRAS蛋白的小鼠扁桃体上皮细胞，用于构建头颈癌模型。该细胞系由韩国国家癌症中心提供，培养于补充4 mM L-谷氨酰胺、4500 mg/L葡萄糖、青霉素（100 IU/ml）、链霉素（100 μg/ml）、两性霉素B（0.25 μg/ml）和10%胎牛血清的DMEM培养基中。

Poor prognosis of mEER tumor-bearing mice after mHTV immunization

辅助性细胞因子如IL-12对癌症免疫治疗至关重要，因为多数肿瘤会形成免疫抑制性微环境（图1A）。本研究使用的抗原与细胞因子如图1B所示。mRNA/LNP制剂具有均一的粒径（103-106 nm）、6-8 mV的Zeta电位、低多分散指数（<0.3）和＞95%的包封率（图1C，附图1）。对mEER荷瘤小鼠进行两次mHTV免疫后，肿瘤生长未受显著抑制（图1D），且所有小鼠在40天内死亡（图1E），表明需探索更有效的联合治疗策略。

Discussion

HPV驱动的头颈癌通过性接触高度传播，对男女均构成严重威胁。当前亟需能预防转移或复发的治疗性疫苗。肿瘤通过诱导CD8⁺ T细胞耗竭和增加调节性T细胞（Treg）逃避免疫监视。本研究证明E7与IL-12 mRNA联合免疫可显著抑制肿瘤生长，并诱导肺组织中长期存在的抗原特异性记忆T细胞，这对防御转移至关重要。局部表达IL-12避免了系统性毒性，为临床转化提供安全性依据。

Conclusion

IL-12 mRNA与E7 mRNA联合使用显著增强头颈癌模型抗肿瘤效果，促进免疫记忆形成，降低复发与转移风险。相较于蛋白系统性给药，mRNA技术实现局部表达，为癌症免疫治疗提供更安全、精准的策略。